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核酸酶:凡是可以降解核酸的酶類,很多。限制性內(nèi)切酶是核酸酶的一類。作催化作用的DNA降解酶、RNA降解酶都可以是核酸酶。核酶:本質(zhì)為RNA的酶。大多數(shù)核酶通過催化轉(zhuǎn)磷酸酯和磷酸二酯鍵水解反應(yīng)參與RNA自身剪切、加工過程。不是以降解為目標(biāo)因此不算核酸酶。
超級(jí)核酸酶是一種來源于粘質(zhì)沙雷氏菌的非特異性核酸內(nèi)切酶,也稱全能核酸酶或廣譜核酸酶。該核酸酶可在非常寬泛的條件下降解單鏈、雙鏈、線狀、環(huán)狀、天然或變性等各種形式的DNA或RNA,產(chǎn)生長(zhǎng)度為3至5個(gè)堿基的5'-單磷酸寡核苷酸。可以用于化學(xué)破菌而省去超聲儀或高壓均質(zhì)機(jī),或者結(jié)合化學(xué)破菌大幅度減少超聲儀或高壓均質(zhì)機(jī)的工作負(fù)荷。
超級(jí)核酸酶主要應(yīng)用:
1、去除核酸污染:在蛋白純化時(shí)與細(xì)胞裂解液配合,可有效降低樣品黏度,利于下游操作;
2、減少存放的外周血單細(xì)胞(PBMC)的結(jié)塊現(xiàn)象。
3、降解核酸,利于不可溶蛋白復(fù)性前高質(zhì)量包涵體的制備;
4、疫苗和病毒樣品制備過程中DNA污染的去除。
5、有效去除帶負(fù)電荷的核酸對(duì)蛋白樣品分離和檢測(cè)的影響;
6、用于對(duì)任何蛋白樣品結(jié)合的核酸的預(yù)處理,提高蛋白在2D凝膠電泳中的分辨率。
7、有效防止細(xì)胞成團(tuán),在細(xì)胞培養(yǎng)液中或某些細(xì)胞凍存液中加入適量核酸酶,可以防止細(xì)胞成團(tuán),以利于后續(xù)細(xì)胞分析和檢測(cè)。核酸酶沒有蛋白酶的活性殘留,本身也不會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害,因此是防止細(xì)胞成團(tuán)的理想選擇。