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真核表達細胞區(qū)別于原核細胞主要在于有細胞核,核內(nèi)遺傳物質(zhì)由核膜將其與細胞的其他成分隔開。真核細胞的遺傳物質(zhì)主要存在于細胞核內(nèi),細胞內(nèi)的其他細胞器如線粒體和葉綠體等也含有少量遺傳物質(zhì)。真核表達是近年來常用的一種表達重組蛋白的手段,它補充了一些原核蛋白表達系統(tǒng)中所缺乏的功能,例如真核表達時能夠形成穩(wěn)定的二硫鍵,在蛋白經(jīng)過翻譯后可對蛋白進行正確修飾,使表達出來的蛋白更具天然活性而不是被降解或者是形成包涵體;利用真核表達系統(tǒng)可以誘導高效表達,加快了人們對基因研究以及藥物研究的進程。
真核表達細胞優(yōu)點是哪些:
按照原核生物蛋白與靶DNA間作用的高度特異性設(shè)計,而靶DNA與真核基因調(diào)控序列基本無同源性,故不存在基因的非特異性激活或抑制;
能誘導基因高效表達,可達很多倍,為其他系統(tǒng)所不及;
能嚴風格控基因表達,即不但可控制基因表達的“開關(guān)”,還可人為地調(diào)控基因表達量。
真核表達細胞表達外源基因的意義:
研究基因表達產(chǎn)物的功能生產(chǎn)有生物活性的蛋白質(zhì):
將目的基因?qū)敫鞣N細胞中,觀察表達產(chǎn)物對細胞活動的影響從而推論其功能特征。通過突變研究基因表達產(chǎn)物功能區(qū)及關(guān)鍵位點。制備過量表達產(chǎn)物用于結(jié)構(gòu)分析。