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哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)是適用于生成具有天然結(jié)構(gòu)和活性的哺乳動(dòng)物蛋白的選用表達(dá)平臺(tái),可以實(shí)現(xiàn)高水平的翻譯后加工,使蛋白質(zhì)獲得最佳功能活性,適合在最類(lèi)似生理學(xué)的環(huán)境中研究特定蛋白質(zhì)的功能。它常用于抗體和治療性蛋白質(zhì)以及人類(lèi)功能細(xì)胞分析的蛋白質(zhì)表達(dá)。
哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng)與其它系統(tǒng)相比,該系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)在于能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的正確折疊,提供復(fù)雜的N型糖基化和準(zhǔn)確的O型糖基化等多種翻譯后加工功能,因而表達(dá)產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學(xué)功能方面接近天然高等生物蛋白質(zhì)分子。
哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)優(yōu)點(diǎn):
1.重組DNA易轉(zhuǎn)染,遺傳穩(wěn)定,可重復(fù)。
2.識(shí)別和去除內(nèi)含子。
3.進(jìn)行翻譯后修飾:磷酸化、糖基化、二硫鍵、寡聚體等的形成、高級(jí)結(jié)構(gòu)的正確折疊。
4.產(chǎn)品的構(gòu)型正確率高,可被改造成類(lèi)人體原性,免疫原性好。
5.可分泌至培養(yǎng)基,提純工藝簡(jiǎn)單。
6.可用于基因治療。
哺乳動(dòng)物瞬時(shí)表達(dá)所用正常的哺乳動(dòng)物細(xì)胞具有下列四大生物學(xué)特性:
1.錨地依賴(lài)性:細(xì)胞必須負(fù)在固體上或固定的表面才能生長(zhǎng)分裂。
2.血清依賴(lài)性:細(xì)胞必須具有生長(zhǎng)因子才能正常生長(zhǎng)。
3.接觸抑制性:細(xì)胞與細(xì)胞接觸后,生長(zhǎng)便受到抑制。
4.形態(tài)依賴(lài)性:細(xì)胞成扁平狀,并有長(zhǎng)纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。