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真核表達細胞表達產(chǎn)物在分子結(jié)構(gòu)、理化特性和生物學功能方面更接近于天然的高等生物蛋白質(zhì)分子。
原核基因表達調(diào)控與真核存在很多共同之處。但因原核生物沒有細胞核，亞細胞結(jié)構(gòu)及其基因組結(jié)構(gòu)要比真核簡單得多。
1.原核基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)特點
?、?sigma;因子識別特異啟動序列，不同的σ因子決定特異基因的轉(zhuǎn)錄激活，決定mRNA,rRNA和tRNA基因的轉(zhuǎn)錄。
?、瞥齻€別基因外，原核生物絕大多數(shù)基因按功能相關(guān)性成簇的串聯(lián)、密集于染色體上，共同組成一個轉(zhuǎn)錄單位——操縱子。一個操縱子只含一個啟動序列及數(shù)個可轉(zhuǎn)錄的編碼基因。
2.真核細胞結(jié)構(gòu)及基因組結(jié)構(gòu)遠比原核復雜，其基因表達調(diào)控機制發(fā)生在染色體活化、基因轉(zhuǎn)錄激活、轉(zhuǎn)錄后加工、翻譯及翻譯后加工等水平的調(diào)節(jié)事件也要復雜的多。
真核細胞常見表達載體：
1.pCMVp-NEO-BAN載體
特點:該真核細胞表達載體分子量為6600堿基對，主要由CMVp啟動子、兔β-球蛋白基因內(nèi)含子、聚腺嘌呤、氨青霉素抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架構(gòu)成，在大多數(shù)真核細胞內(nèi)都能高水平穩(wěn)定地表達外源目的基因。
2.pEGFP,增強型絳色熒光蛋白表達載體
特點:pEGFP表達載體中含有綠色熒光蛋白，在PCMV啟動子驅(qū)動下，在真核細胞中高水平表達。載體骨架中的SV40origin使該載體在任何表達SV40T抗原的真核細胞內(nèi)進行復制。
3.pEGFT-Actin,增強型綠色熒光蛋白/人肌動蛋白表達載體
特點:pEGFP-Actin表達載體中含有綠色熒光蛋白和人胞漿β-肌動蛋白基因，在PCMV啟動子驅(qū)動下，在真核細胞中高水平表達。載體骨架中的SV40origin使該載體在任何表達SV40T抗原的真核細胞內(nèi)進行復制。
