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賽默飛離子色譜法測(cè)定液態(tài)奶中的硫氰酸根
閱讀：853 發(fā)布時(shí)間：2019-6-11硫氰酸是無色、易揮發(fā)、有強(qiáng)烈氣味的強(qiáng)酸性液體，略有毒性。硫氰 酸稀溶液穩(wěn)定，如加熱或與氫硫酸及無機(jī)酸作用，可分解成為氰hua物，有ju毒。硫氰酸鹽是致甲狀腺腫物質(zhì)， 可阻滯甲狀腺激素合成，引起甲狀腺腫。 有文獻(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)加入微量的硫氰酸鹽和過氧化氫（分別約為12和8.5 mg/L）， 會(huì)在牛奶中獲得較好的抗菌的乳過氧化物酶（LP）體系活動(dòng)，可作為一種可 靠的方法用于保存冷卻過的或未冷卻過的生奶。衛(wèi)生部在禁止使用的添加劑 名錄中規(guī)定：硫氰酸根不可以作為乳及液態(tài)奶的添加劑。本研究建立了測(cè)定 液態(tài)奶中硫氰酸根的離子色譜法，方法簡便、快速，實(shí)用性強(qiáng)，回收率好， 檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定可靠。
測(cè)試條件
儀器：戴安ICS 3000離子色譜儀系統(tǒng) 分析柱：IonPac AS 16，250×4 mm； 保護(hù)柱：IonPac AG 16，50×4 mm 柱溫：30 ℃ 淋洗液：KOH（淋洗液在線發(fā)生裝置產(chǎn)生）梯度淋洗， 0~13 min，45 mmol/L；13.1 ~18 min，70 mmol/L 淋洗液源：帶有CR-ATC的EGC II KOH 流速：1.00 mL/min ； 定量環(huán)：100 µL 抑制器：ASRS ULTRA II 4 mm，外接水電抑制，電 流為124 mA
檢測(cè)方式：抑制型電導(dǎo)
樣品前處理方法
直接量取混合均勻的液態(tài)奶樣品4 mL至玻璃刻度管 中（定容），加入5 mL色譜純乙腈，渦旋混勻，常溫下 沉降10 min。取沉降好的樣品，取上清液用超純水稀釋10 倍（如上清液較少，可離心后提取上清液），過0.22 µm 的濾膜，過1.0 cc OnGuard RP柱除去樣品中脂肪，然后 進(jìn)樣檢測(cè)。OnGuard RP柱在使用前依次用5 mL甲醇和 10 mL水活化，放置20 min 后使用。
結(jié)果和討論
色譜柱的選擇及淋洗液梯度條件優(yōu)化
硫氰酸根是易極化陰離子，疏水性強(qiáng)，在常規(guī)的陰 離子交換柱如IonPac AS9-HC、IonPac AS14和Ion-Pac AS11-HC色譜柱上保留時(shí)間長且拖尾嚴(yán)重。IonPacAS16 色譜柱為強(qiáng)親水性的陰離子交換柱，對(duì)于疏水性離子的分 離具有分離時(shí)間短、分離度高、峰形對(duì)稱等特點(diǎn)。采用合 適濃度的OH-溶液等度淋洗，SCN-在12 min內(nèi)實(shí)現(xiàn)迅速分 離，分離效果非常理想。該系統(tǒng)用于硫氰酸根的分析， 既克服了樣品中基體離子的干擾，又大大縮短了SCN-的 保留時(shí)間。由于硫氰酸根屬于疏水性陰離子，在陰離子交 換色譜柱上保留相對(duì)較強(qiáng)，因此一般情況下需要濃度較高 洗脫能力較強(qiáng)的淋洗液進(jìn)行淋洗，或者需要進(jìn)行梯度淋 洗，從而得到更好的效果。本試驗(yàn)選擇了45 mmol/L KOH 進(jìn)行等度淋洗，并在SCN-出峰后，使用高濃度70 mmol/L 的KOH淋洗液沖洗5 min的色譜柱，將吸附在色譜柱上的 強(qiáng)保留性的物質(zhì)洗脫下來，然后需要平衡回到起始濃度。 因此本方法選用了KOH梯度淋洗作為試驗(yàn)條件。
液態(tài)奶前處理?xiàng)l件的確定
液態(tài)奶中含有大量的蛋白和脂肪， 這些需要在進(jìn)入 色譜柱之前除去。常用的去除奶中蛋白的方法有酸沉降、 鹽沉降和有機(jī)溶劑沉降。溫度對(duì)沉降效果有顯著影響。低 溫條件下（0℃），蛋白沉降效果明顯快于常溫條件，但 常溫沉降的回收率要明顯高于低溫沉降。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，我們 選擇牛奶∶乙腈＝4∶5來沉降蛋白。沉降蛋白需要的時(shí) 間為10 min左右。
線性范圍、檢出限及回收率
配制硫氰酸根質(zhì)量濃度為0.02、0.05、0.10、0.20、 0.50、1.00 mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液，按照1.2中的色譜 條件進(jìn)樣檢測(cè)，并以標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰 面積（Y）為縱坐標(biāo)作圖，同時(shí)用小二乘法進(jìn)行線性回 歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為Y＝0.1327X－0.0007（r＝ 0.9996），在0.02～1.0 mg/L范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)量濃度與 峰面積值具有良好的線性關(guān)系。將標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣，以信 噪比為10（S/N＝10）計(jì)算，硫氰酸根的低檢出濃度 為0.012 mg/L，按1.3中樣品處理方法，液態(tài)奶中硫氰酸 根低檢出限為0.3 mg/L。
實(shí)際樣品分析
利用本文建立的方法對(duì)零售市場(chǎng)的幾種液態(tài)奶進(jìn)行了 本底和加標(biāo)回收試驗(yàn)，該方法對(duì)這些樣品均具有良好的適 用性，色譜無干擾，檢測(cè)結(jié)果見表1?？梢钥闯黾訕?biāo)回收 率均在85%～97%之間，RSD小于3.6%，重現(xiàn)性良好。
