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【實驗室技能】細胞凍存全攻略:讓你的細胞“休眠”更安心!

2025-3-6  閱讀(116)

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親愛的科研小伙伴們,是否經(jīng)常為細胞狀態(tài)不穩(wěn)定而焦慮?是否擔(dān)心辛苦培養(yǎng)的細胞因意外污染全軍覆沒?今天帶您解鎖科研界的"細胞時光機"——超詳細細胞凍存指南,文末更有凍存失敗的6大避坑指南!

為什么說凍存是細胞房的頭等大事?

? 建立珍貴細胞株的"備份保險箱"

? 避免連續(xù)傳代導(dǎo)致的遺傳漂變

? 應(yīng)對實驗室突發(fā)停電的預(yù)案

? 課題交接時最硬核的"學(xué)術(shù)遺產(chǎn)"

教科書級凍存操作七步曲

1?? 【黃金時刻】選擇對數(shù)生長期細胞

(Tips:融合度80-90%時為最佳窗口期)

2?? 預(yù)冷凍存液:含10%DMSO的胎牛血清

3?? 細胞消化后懸液離心(1000rpm,5min)

4?? 凍存液輕柔重懸(濃度建議:5×10?/mL)

5?? 分裝凍存管(切記標注:細胞名稱/代數(shù)/日期/操作者)

6?? 程序性降溫:4℃→-20℃→-80℃梯度冷凍

7?? 最終歸宿:液氮罐氣相層(-196℃長期保存)

90%新手不知道的凍存黑科技

? 凍存管要用內(nèi)部螺紋款(防液氮滲漏)

? 梯度降溫神器:異丙醇冷凍盒比傳統(tǒng)酒精燈更安全

? 復(fù)蘇后存活率檢測:臺盼藍染色+雙熒光活死細胞檢測

? 重要細胞株的"三重備份原則"(不同凍存批次+不同液氮罐)

凍存失敗的六大"隱形殺手"

??警報!凍存管從-80℃取出時冒白霜(冰晶形成警報)

?? DMSO未提前預(yù)冷導(dǎo)致放熱損傷

?? 復(fù)蘇時水浴溫度超過40℃(37℃才是黃金溫度)

?? 未使用細胞專用凍存管(普通EP管會爆裂)

?? 液氮罐未定期補充液氮(氣相保存≠保存)

?? 忘記做支原體檢測直接凍存(小心污染全軍覆沒)

埃澤思生物供應(yīng)多款細胞凍存液。對于常規(guī)工具細胞,以及 MSC、iPSC 等珍貴細胞,均有與之相匹配的相應(yīng)凍存方案。同時,針對不同的細胞培養(yǎng)工藝,還能提供不同劑型、不同濃度的細胞凍存體系。滿足您的需求,必定能成為您產(chǎn)品研發(fā)之路上的助力。

埃澤思相關(guān)產(chǎn)品推薦

無血清細胞凍存液(治療級)





  • 完成CDE備案, 符合CDE規(guī)定IND申報規(guī)則

  • 無需程序降溫 , 凍存于-80℃冰箱后置液氮中長期保存

  • 凍存細胞復(fù)蘇率均高于95%

  • 無血清成分,極大降低批次間差異

  • 無血清,無各類病毒和支原體等污染的可能性

  • 生產(chǎn)過程遵循ISO9001體系, 嚴格執(zhí)行cGMP操作標準

無血清細胞凍存液(科研級)




  • 無血清,無各類病毒、霉菌和支原體等污染的可能性

  • 無血清成分,極大降低批次間差異

  • 凍存細胞復(fù)蘇率高達95%

  • 即用型產(chǎn)品,無需程序降溫,凍存于-80℃冰箱后置液氮中長期保存

ES/iPS 細胞凍存液




  • 無動物源成分,降低各類病毒、霉菌和支原體等的污染風(fēng)險

  • 成分確定,批次間差異小

  • 細胞復(fù)蘇效率高,該凍存液凍存細胞復(fù)蘇率高于血清凍存方法

  • 即用型產(chǎn)品,且無需程序降溫可直接-80℃冰箱過夜后轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存


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