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2023-9-22 閱讀(381)
溴化乙錠在電泳中的作用是什么？
在通過瓊脂糖凝膠電泳分離 DNA 片段的過程中，有時會將溴化乙錠 (EtBr) 添加到運行緩沖液中。 使用它是因為在分子與 DNA 結(jié)合并用紫外光源照射后，可以看到 DNA 條帶圖案。
溴化乙錠的用途是什么？
溴化乙錠是凝膠中常用的DNA 和 RNA 檢測染料。 溴化乙錠是一種 DNA 嵌入劑，將自身插入雙螺旋中的堿基對之間。
溴化乙錠在凝膠電泳中的用途是什么？為什么在使用溴化乙錠時要始終戴手套？
必須戴手套并注意避免污染實驗室以及做好個人進(jìn)行防護(hù)。當(dāng)凝膠暴露在紫外線下時，可以在一條帶中看到低至 0.05 μg 的 DNA。 EtBr-核酸復(fù)合物吸收約 260 或 300 nm 的紫外輻射。
溴化乙錠如何使 DNA 可見？
溴化乙錠也用于瓊脂糖凝膠電泳分離 DNA 片段。 它被添加到運行緩沖液中并通過插入 DNA 堿基對之間進(jìn)行結(jié)合。 當(dāng)使用紫外光照射瓊脂糖凝膠時，DNA 條帶變得可見。
EtBr 如何與 RNA 結(jié)合？
溴化乙錠 結(jié)合在 DNA 中堆積的堿基之間。作為一個大的平面分子，它通過在單個 DNA（或 RNA）鏈的堆疊堿基之間以及互補鏈的堿基之間形成緊密的范德華接觸而結(jié)合。
溴化乙錠和考馬斯亮藍(lán)在凝膠電泳中起什么作用？
在凝膠電泳過程中對核酸進(jìn)行染色有幾種選擇:溴化乙錠 (EtBr) 是常用的 DNA 染料。此外，它在藍(lán)光下發(fā)出熒光，可防止使用紫外線時發(fā)生的 DNA 損傷。
使用溴化乙錠 EtBr 進(jìn)行染色有哪兩個優(yōu)點？
溴化乙錠在水溶液中的熒光明顯低于螯合染料。溴化乙錠是一種敏感、易染色的 DNA。它產(chǎn)生低背景和 1-5ng/band 的檢測限。
EtBr 在瓊脂糖凝膠中的作用是什么？
EtBr 用作著色劑，為 DNA 提供顏色。 EtBr 在瓊脂糖凝膠電泳中用作分離劑。EtBr 嵌入 DNA 堿基對之間并在紫外光下發(fā)出熒光。通過使用標(biāo)準(zhǔn)的橙色濾光片，可以看到橙色的 DNA。
為什么 EtBr 會與 DNA 發(fā)生熒光？
溴化乙錠與 DNA 結(jié)合后發(fā)出強烈熒光的原因是堿基對之間存在疏水環(huán)境。通過進(jìn)入該環(huán)境并遠(yuǎn)離溶劑，EtBr 陽離子被迫脫落任何與水相關(guān)的分子。
