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2021-8-27 閱讀(435)
培養(yǎng)環(huán)境中許多化學物質(zhì)都可以引起細胞的污染?;瘜W物質(zhì)并不總是抑制細胞的生長,某些化學物質(zhì)如激素就可促進細胞的生長。不同細胞對化學物質(zhì)污染的反應是不一樣的。未純化的物質(zhì)、試劑、水、血清、生長輔助因子及儲存試劑的容器都可能成為化學性污染的來源。細胞培養(yǎng)的必需養(yǎng)分,如氨基酸,若濃度超過了合適的范圍,也會對細胞產(chǎn)生毒性。同樣,不同細胞系其最佳培養(yǎng)條件下對血清和緩沖液的要求是不一樣的,在培養(yǎng)中應嚴格控制。玻璃制品清洗過程中殘留的變性劑或肥皂(通常殘留在瓶蓋的內(nèi)表面)是最常見的化學性污染。
水:水是在凝固時膨脹的化合物。因此在選擇凍存細胞的容器時應考慮到這個因素。容器因水的膨脹而發(fā)生破裂是引起試劑污染的重要原因。為了避免金屬離子、有機分子、細胞內(nèi)毒素等物質(zhì)對水的污染,在配制液體,清洗容器時必須使用不含雜質(zhì)的超純水。需要注意的是,超純水放置過久其純度會下降。
在高壓蒸氣滅菌及蒸餾水時水經(jīng)常被污染,因為高壓蒸氣鍋及純水機的常規(guī)維護后可能有少量的化學物質(zhì)殘留。為了保證水的純度,我們應采取措施盡量避免化學物質(zhì)的殘留。
血清: 動物血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,但血清又是潛在的生物及化學污染的來源。由于血清采集于多個動物,而且不同廠商的生產(chǎn)工藝及質(zhì)量各不相同,因此血清中許多成分的濃度存在很大的變異。血清對不同細胞的促生長能力及毒副作用取決于這些細胞的分化功能、組織來源及培養(yǎng)基的成分等因素。在進行一系列實驗時,為了保證實驗的可重復性,最好選用同一批次的血清。
培養(yǎng)液:培養(yǎng)附加成分、試劑 培養(yǎng)液、培養(yǎng)附加成分、試劑都可能成為化學性污染的來源。細胞培養(yǎng)使用的所有物質(zhì)都應是高純度的,并經(jīng)過機構的鑒定,實驗者本人也應對上述成分進行純度鑒定。同時,正確配置和儲存培養(yǎng)液及試劑也是非常重要的,應該采取標準的操作步驟,避免液體體積計算錯誤,混用類似化合物等錯誤。
培養(yǎng)器皿及容器: 細胞培養(yǎng)過程中會使用到各種不同的培養(yǎng)器皿及容器。培養(yǎng)器皿的大小,構形設計可能會影響到培養(yǎng)中氣體交換、濕度、培養(yǎng)液的pH值和細胞生長密度。培養(yǎng)器皿的工藝及滅菌過程中的差異可能對培養(yǎng)體系產(chǎn)生影響。塑料制品在生產(chǎn)過程中可能殘留一些有毒成形劑,生產(chǎn)工藝的不同可能引起器皿表面附著能力的不同。儲存不同物質(zhì)時應選用合適的塑料或玻璃容器,因為酒精、強酸、強堿能夠溶解塑料或玻璃的某些成分。