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上海吉至生化科技有限公司
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2018-12-12 閱讀(460)
結(jié)締組織狹義上是指其含有的三種纖維：膠原纖維、網(wǎng)狀纖維、彈力纖維、而膠原纖維（collagen fiber）是分布廣、含量多的一種纖維。
Masson三色染色是結(jié)締組織染色中經(jīng)典的一種方法，是顯示組織中纖維的主要方法之一，是膠原纖維染色而經(jīng)典的技術(shù)方法。該法染色原理與陰離子染料分子的大小和組織的滲透有關(guān)，分子的大小由分子量來(lái)體現(xiàn)，小分子量易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松的、滲透性高的組織。然而，淡綠或苯胺藍(lán)的分子量都很大，因此Masson染色后肌纖維呈紅色，膠原纖維呈綠色或藍(lán)色，主要用于區(qū)分膠原纖維和肌纖維。
Masson 三色染色試劑盒主要成份：
1.weigert鐵蘇木素A液
2.weigert鐵蘇木素B液
3.麗春紅酸性品紅染液
4.磷鉬酸溶液
5.苯胺藍(lán)溶液
樣本要求： 組織片充分固定和脫蠟。
Masson 三色染色試劑盒染色方法：
1.組織固定于bouin氏液或zenker氏液，流水沖洗過(guò)夜，常規(guī)脫水包埋
2.切片脫蠟水
3.weigert鐵蘇木素（weigert鐵蘇木素A、B液等比例混和）染5-10分，流水稍洗
4. 1%鹽酸酒精分化，流水沖洗數(shù)分
5. 麗春紅酸性品紅染液染5-10分，流水稍沖洗。
6.磷鉬酸溶液處理約5分鐘，不用水洗，直接用苯胺藍(lán)人染液復(fù)染5分鐘
7. 1%冰醋酸處理1分鐘，95%酒精脫水多次。.*脫水、二甲苯透明，中性樹膠封固。
Masson 三色染色檢驗(yàn)結(jié)果：
膠原纖維、粘液、軟骨呈藍(lán)色，肌纖維、纖維素和紅細(xì)胞染紅色、胞核染藍(lán)黑色。、
注意事項(xiàng)：
1.weigert鐵蘇木素分A、B兩液，應(yīng)與臨用前將兩液等分混合，而不宜預(yù)先混合，否則容易氧化沉淀而逐漸失去染色能力。
2.組織用bouin氏液或zenker氏液固定為佳，如已用10%甲醛液固定，切片可在脫蠟水后，再放入bouin氏液作用一晚或置37℃溫箱內(nèi)1-2小時(shí)，然后流水沖洗切片黃色消失再進(jìn)行染色。
3.磷鉬酸處理時(shí)，要鏡下控制，見(jiàn)肌纖維呈紅色，膠原纖維呈淡紅色即可。
