1. 收到本品(Camptothecin儲(chǔ)存液,5mM in DMSO)后按照50µl的小量分裝,凍存在-20℃,避免反復(fù)凍融,若是凍融建議不要超過2次。
2. 加入4-12µM終濃度的Camptothecin到細(xì)胞懸液內(nèi)(細(xì)胞密度一般1 x 105–1 x 106 cell/ml培養(yǎng)液),于37℃孵育2-12h。注意:對(duì)于初次建立的凋亡體系,需要就誘導(dǎo)時(shí)間和作用濃度進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)以達(dá)到滿足實(shí)驗(yàn)要求的凋亡水平。比如,對(duì)于Jurkat或者HL60細(xì)胞懸液,通常在6-12µM的濃度范圍內(nèi)37℃誘導(dǎo)4h即可達(dá)到理想的凋亡水平。