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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>細(xì)胞分析>>細(xì)胞活性>> MTS細(xì)菌活性檢測試劑盒

MTS細(xì)菌活性檢測試劑盒
  • MTS細(xì)菌活性檢測試劑盒
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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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更新時間:2025-03-15 08:56:15瀏覽次數(shù):306評價

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產(chǎn)品概述 product description 貝博® BBoneBot® 細(xì)菌活性檢測試劑盒 (MTS法) 是應(yīng)用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細(xì)菌活性的比色檢測產(chǎn)品。 本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被細(xì)菌的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與細(xì)菌的活性成正比。細(xì)菌活性越強,則顏色越深;細(xì)菌活性越弱,則顏色越淺。對于同樣的細(xì)菌,顏色的深淺和細(xì)菌活性呈線性關(guān)系。
保存溫度
2-8℃避光
注意事項
1.長期不用可以-20℃保存。
2.染色液避免反復(fù)凍融。多次凍融會導(dǎo)致失效。
3.染色液需要長期保存時可以根據(jù)使用情況進行小量分裝后-20℃保存。
4.試劑拆封后請盡快使用完!
有效期
一年
檢測方法
酶標(biāo)儀
適用樣本
細(xì)菌
產(chǎn)品特點
1.使用方便:僅使用單一試劑;
2.靈敏度高,數(shù)據(jù)可靠,重現(xiàn)性好,線性范圍更寬;
3.結(jié)果穩(wěn)定:試劑本身穩(wěn)定性高,實驗結(jié)果穩(wěn)定可靠;
4.無需放射性同位素和有機溶劑,對微生物毒性低;
5.適合于高通量藥物篩選。
產(chǎn)品應(yīng)用
酶標(biāo)儀
儀器準(zhǔn)備
1.帶有450nm濾光片的酶標(biāo)儀
2.CO2培養(yǎng)箱
3.離心機
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒

試劑準(zhǔn)備
1.PBS 2.HBSS
耗材準(zhǔn)備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
4.96孔培養(yǎng)板


使用注意事項
1.旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
2.需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會增加空白吸收,從而影響檢測結(jié)果。小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
3.正式實驗前,建議先做幾個孔摸索接種細(xì)菌的數(shù)量和加入MTS試劑后的培養(yǎng)時間。培養(yǎng)時間一般在1-4小時。
4.部分藥物可能對檢測有影響,有影響時需去除藥物后再檢測,無影響時直接檢測。用培養(yǎng)基或PBS來配制待檢測藥物,加入MTS試劑,測藥物溶液在450 nm處的吸光度。如果該吸光度與不含藥物僅加MTS試劑的培養(yǎng)基或PBS吸光度差異不大,則可以直接加入MTS,如果吸光度相對較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌菌體兩次,然后加入新的100μl培養(yǎng)基和10μl MTS進行檢測。
5.接種時注意菌液一定要混勻,以避免菌體沉淀下來,導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不等,可以每接種幾個孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā),為了減少誤差,建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基,而不作為指標(biāo)檢測孔。
6.細(xì)胞接種數(shù)量的選擇,可以用不同的細(xì)胞數(shù)接種,然后加入MTS試劑,1小時,2小時,3小時檢測450nm 以O(shè)D值1.0左右為標(biāo)準(zhǔn)選擇細(xì)胞數(shù)。
7.有條件的情況下建議采用多通道移液器,可以減少平行孔間的差異。加 MTS試劑時,建議斜貼著培養(yǎng)板壁加,不要插到培養(yǎng)基液面下加,容易產(chǎn)生氣泡,會干擾O.D值讀數(shù)。
8.如果不是使用96孔板檢測,MTS溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
9.本試劑盒用于細(xì)菌的檢測,不可用于酵母檢測。
10.MTS試劑加樣量較小時,也可以用培養(yǎng)基稀釋MTS試劑后加樣以減小誤差。
11.本試劑無細(xì)胞毒性,可以在檢測后進行細(xì)胞培養(yǎng),也可以再進行其他檢測。
12.某些實驗中吸光度值太高,可以減少細(xì)胞數(shù)量,或者縮短加入MTS后的培養(yǎng)時間。
13.如果OD值偏低,可以適當(dāng)增加細(xì)胞數(shù)量或延長加入MTS后的培養(yǎng)時間。
14.接種細(xì)胞時要充分重懸,接種均勻。細(xì)胞是否接種均勻?qū)Y(jié)果影響較大。
15.OD值在0.5-2.0之間均可,值控制在1.0左右,小于0.5或大于2.0請調(diào)整接種量和培養(yǎng)時間。
16.如果細(xì)胞數(shù)據(jù)出現(xiàn)異常增加,或者數(shù)據(jù)結(jié)果的方向相反等問題,可能是實驗中產(chǎn)生了氣泡、鋪板不均勻等操作問題,請重復(fù)實驗。
使用方法
1. 制備適當(dāng)濃度微生物細(xì)胞的懸液,在96孔板內(nèi)每孔接種190μl懸液。
2. 每孔加入10μl的染色溶液。
3. 將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(37℃或合適的溫度)。
4. 用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度。

細(xì)胞活力計算:
各重復(fù)孔的OD值取平均數(shù)。
細(xì)胞活力% =(測試孔OD-空白OD/對照孔OD-空白OD)×100

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