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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>細(xì)胞分析>>細(xì)胞代謝>> 總巰基檢測試劑盒-微孔板

總巰基檢測試劑盒-微孔板
  • 總巰基檢測試劑盒-微孔板
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更新時(shí)間:2025-03-14 17:59:58瀏覽次數(shù):163評(píng)價(jià)

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產(chǎn)品概述 product description 貝博TM BBcellProbe® 總巰基檢測試劑盒是利用經(jīng)典的Ellman法進(jìn)行總巰基檢測的試劑盒。試劑盒準(zhǔn)確性高,重復(fù)性和抗干擾性強(qiáng),使用方便,可用于測各種動(dòng)物的血清/血漿、組織、細(xì)胞、培養(yǎng)液以及植物組織樣本等。 生物體內(nèi)活性巰基(SH)主要包括巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基能夠修復(fù)氧化損傷的蛋白質(zhì),參與活性氧清除。蛋白質(zhì)巰基主要存在于半,是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和生物體內(nèi)某些氧化還原反應(yīng)重要基團(tuán),在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中2個(gè)巰基脫氫而形成的雙硫鍵,使相鄰多肽得以連接.對(duì)于維持蛋白質(zhì)完整結(jié)構(gòu)作用十分重要。巰基還是很多酶的活性基團(tuán),一些重金屬鹽如Hg2+等與酶巰基結(jié)合,影響酶活性。巰基化合物與機(jī)體許多機(jī)能活動(dòng),藥物及毒物的作用以及某些疾病的發(fā)生發(fā)展有著密切關(guān)系。 所......
保存溫度
2-8℃ 避光
注意事項(xiàng)
開蓋后組份按要求條件保存。
有效期
6個(gè)月
檢測方法
分光光度計(jì)
適用樣本
血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液、組織裂解液
產(chǎn)品應(yīng)用
分光光度計(jì)
儀器準(zhǔn)備
1.分光光度計(jì)
2.恒溫水浴鍋
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰盒

試劑準(zhǔn)備
1.生理鹽水
2.純水
3.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
1.96孔板
2.吸頭

使用注意事項(xiàng)
1.試劑B2干粉開蓋使用前先敲入瓶底部,防止開蓋時(shí)灑落導(dǎo)致?lián)p失。
2.血清/培養(yǎng)液等液體樣本直接檢測或用生理鹽水稀釋后檢測。
3.檢出限為10μmol/L。
使用方法
1. 樣品準(zhǔn)備
組織樣本:按照組織質(zhì)量(g):生理鹽水體積(mL)為1:5~10 的比例(建議稱取約0.1g 組織,加入1mL 生理鹽水)進(jìn)行冰浴勻漿,然后8000g,4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
血清,培養(yǎng)液:直接測定。

2. 試劑配制:
使用前,準(zhǔn)確吸取10ml試劑B1加入試劑B2干粉,充分溶解混勻,即成試劑B工作液,4℃避光保存。

3. 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min,調(diào)節(jié)波長至412nm,蒸餾水調(diào)零。

4. 總巰基的測定
按下表在96孔板中加入試劑,對(duì)照孔每個(gè)樣品均做。
混勻,25℃靜置10min,測定412nm 吸光值。
ΔA=A 測定-A 對(duì)照。
【注】:
? 如果OD值太大,可以將樣品用試劑A稀釋后再檢測。

5. 計(jì)算
血清中總巰基含量(mmol/L)
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷V 樣×103
=5800×ΔA

組織細(xì)胞中總巰基含量(mmol/g)
(1)按樣本重量計(jì)算
總巰基含量(μmol/g 鮮重)
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)
=5.8×ΔA÷W

(2)按樣本蛋白濃度計(jì)算
總巰基含量(μmol/mg prot)
=ΔA ÷0.8618×V 反總÷(V 樣×Cpr)
=5.8×ΔA÷Cpr

【注】:
V 反總:反應(yīng)總體積,0.2mL;
V 樣:反應(yīng)中樣品體積,0.04mL;
V 樣總:加入提取液體積,1mL;
W:樣品質(zhì)量,g ;
Cpr:樣本蛋白濃度,mg/mL;
103 :1mmol/ L=103μmol/ L

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