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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質生物學>>蛋白提取和裂解>> 植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）

植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）
  • 植物膜蛋白提取試劑盒（2D電泳用）
參考價 面議
具體成交價以合同協(xié)議為準
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  • 品牌 貝博生物
  • 型號
  • 廠商性質 生產商
  • 所在地
屬性

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更新時間：2025-03-13 20:37:08瀏覽次數(shù)：127評價

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產品概述 product description 貝博TM BBproExtraTM植物膜蛋白提取試劑盒（雙向電泳用）是一種高效的高產膜蛋白提取試劑盒。植物膜蛋白提取試劑盒可以從各種植物中提取膜蛋白，可用于純化膜蛋白的粗品制備及膜蛋白制備。提取過程簡單方便。該試劑盒含有蛋白酶抑制劑混合物和磷酸酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對蛋白的降解，為提取高質量的蛋白提供了保證。 本試劑盒提取的蛋白用于雙向電泳。如需要用于SDS-PAGE電泳檢測、Western blotting、凝膠阻滯實驗、免疫共沉淀、報告基因檢測、酶活分析等下游實驗的試劑盒，請聯(lián)系貝博，選用其它產品號的產品（BB-3152）。
保存溫度
2-8℃
注意事項
1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲存。開蓋使用后-20℃儲存。
2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
3.試劑拆封后請盡快使用完！
有效期
一年
檢測方法
雙向電泳
適用樣本
植物
產品特點
1、 使用方便。
2、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
3、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
4、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含7種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
產品應用
雙向電泳
儀器準備
1.離心機
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
試劑準備
1.PBS緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用注意事項
使用注意事項：
? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內壁上的液體甩至管底，避免開蓋時液體灑落。
? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
? 實驗過程中的所有試劑須預冷；所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。
? 蛋白酶抑制劑儲存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
? 如果試劑盒不能短時間內用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根據(jù)自己實驗需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
?
使用方法
1、 試劑準備：
每500ul膜提取液A中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物，充分混勻后置冰上備用。
2、 取洗凈擦干后并去除葉梗和粗脈的200mg植物組織樣本用刀盡可能剪碎。
3、 加入500ul冷的提取液A，用組織勻漿機/勻漿器充分勻漿。
4、 勻漿后移入一個干凈離心管中在2-8℃振蕩1-2小時。
5、 將提取液在2-8℃條件下12000g離心5分鐘，取上清。
6、 在上清中加入5ul提取液B，充分混勻。
7、 在37℃水浴10分鐘。
8、 在37℃， 1000g離心3分鐘。
9、 此時液體分為2層，小心移除上層部分，吸取下層管底部大約50ul液體。
10、 用50-150μl冷的膜蛋白溶解液C溶解下層溶液，即得膜蛋白樣品。
11、 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌嶒灐?br>
常見問題分析
1.蛋白濃度低？
膜蛋白豐度較低，需要盡可能加大細胞上樣量。處理部分組織樣本時可能沒有裂解，導致蛋白濃度低。只要適當延長試劑A的處理時間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
2.用什么方法定量蛋白？
建議用BCA法。不適合用Bradford法，因為試劑A中含有干擾Bradford法的組份，導致定量不準。如果已經(jīng)進行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。
3.提取的蛋白具有活性嗎？
本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結構，沒有對蛋白質之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構象和活性。

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