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目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)生物學(xué)>>蛋白提取和裂解>> RIPA裂解液（不含triton x-100）

RIPA裂解液（不含triton x-100）
  • RIPA裂解液（不含triton x-100）
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
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  • 品牌 貝博生物
  • 型號(hào)
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
  • 所在地
屬性

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更新時(shí)間：2025-03-13 19:36:49瀏覽次數(shù)：124評(píng)價(jià)

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產(chǎn)品概述 product description 貝博RIPA裂解液采用優(yōu)質(zhì)原料配制，對(duì)動(dòng)物細(xì)胞胞膜、胞漿、胞核成分均有較強(qiáng)裂解作用，是經(jīng)典常用的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的Western、IP等下游實(shí)驗(yàn)。 本RIPA裂解液成分為25mM Tris?HCl pH 7.6, 150mM NaCl, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS。根據(jù)相應(yīng)實(shí)驗(yàn)要求添加自己需要的蛋白酶抑制劑和磷酸酶抑制劑。
保存溫度
2-8℃
注意事項(xiàng)
1.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！

有效期
1年
檢測(cè)方法
WB、IP等
適用樣本
細(xì)胞、組織
產(chǎn)品應(yīng)用
WB、IP等
儀器準(zhǔn)備
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.渦旋混勻器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒 7.勻漿機(jī)/勻漿器
試劑準(zhǔn)備
1.PBS緩沖液 （pH7.4，實(shí)驗(yàn)室常用的10mM磷酸緩沖鹽溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：約含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備
? 離心管
? 吸頭
? 一次性手套
使用注意事項(xiàng)
1.實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。
2.整個(gè)過程須保持樣品處于低溫狀態(tài)。
3.本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
4.螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。
5.禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
6.使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并清除殘留清潔劑。
7.避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

使用方法
A． 細(xì)胞裂解
1. 取5-10×106個(gè)細(xì)胞，在4℃，1000rpm條件下離心5-10分鐘，小心吸取培養(yǎng)基，盡可能吸干，收集細(xì)胞。
2. 用冷PBS洗滌細(xì)胞兩次，每次洗滌后盡可能吸干上清。
3. 每5×106個(gè)細(xì)胞中加入500ul冷的裂解液（每106個(gè)細(xì)胞，大約10mg或10ul壓積，加100ul RIPA裂解液。大約相當(dāng)于6孔板的每孔加入100ul~150ul，或一個(gè)75 cm2培養(yǎng)瓶加1 ml。裂解液和細(xì)胞應(yīng)充分接觸。如果RIPA裂解液不足量，細(xì)胞裂解效率將會(huì)降低），混勻后，在4℃條件下振蕩15-20分鐘。
4. 在4℃，14000rpm條件下離心15分鐘。
5. 快速將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，用于下游實(shí)驗(yàn)。

B． 組織裂解
1. 取100mg組織樣本剪碎，加入1ml裂解液，用組織勻漿器勻漿至無明顯肉眼可見固體。
2. 將組織勻漿吸入另一預(yù)冷的干凈離心管中，在4℃，10000rpm條件下離心5分鐘。
3. 將上清吸入另一預(yù)冷的干凈離心管，用于下游實(shí)驗(yàn)。

上述蛋白提取物可分裝后于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br>

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