使用方法
灌制分離膠 (各試劑使用量請參考附表)
1. 參照凝膠模具說明書,裝配好凝膠模具。(注:加入上層篩板有助于加樣時保持填料與樣品均勻接觸,是否加入上層篩板可根據實際情況選擇。)
2. 將不同體積的Acr-Bis(30%,29:1)、分離膠緩沖液和蒸餾水在小燒杯或試管中混合。
3. 加入10%APS和TEMED,輕輕攪拌使其混勻,避免產生氣泡。
4. 在凝膠模具中灌入適量分離膠溶液(對于mini-gel,凝膠液加至約距前玻璃板頂端1.5 cm或距梳齒約0.5cm即可),然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1~2cm的水層,使凝膠表面保持平整。
5. 靜置30~60min,待分離膠和水層之間出現一個清晰的界面后,表面凝膠已聚合。
根據目的蛋白的分子量大小選擇合適的凝膠濃度