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MDA-MB-157細胞專用培養(yǎng)基(L15)

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更新時間:2023-04-27 09:33:46瀏覽次數(shù):363

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 125mL×4
主要用途 僅供科研實驗 產品濃度
MDA-MB-157細胞專用培養(yǎng)基(L15)的相關產品:ASMC 細胞專用培養(yǎng)基 小鼠背根神經元細胞 SBC-2人小肺癌細胞專用培養(yǎng)基 小鼠背根神經元細胞培養(yǎng)基UMR-106 細胞專用培養(yǎng)基 小鼠表皮成纖維細胞 ECV-304+RFP 細胞專用培養(yǎng)基 小鼠表皮成纖維細胞培養(yǎng)基

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

產品形態(tài)

MDA-MB-157細胞專用培養(yǎng)基(L15)

125mL×4

液體

商品詳細介紹:

由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持MDA-MB-157細胞最佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含MDA-MB-157細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-157細胞的體外培養(yǎng)。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產品說明

產品形態(tài):液體

產品濃度:1×

產品規(guī)格:125mL×4

培養(yǎng)基成分:Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S

細菌檢測:陰性

真菌檢測:陰性

支原體檢測:陰性

細胞生長實驗:細胞生長良好,形態(tài)正常

內毒素含量(EU/mL):≤3

儲存條件:2~8℃,避光儲存

運輸條件:冰袋冷藏運輸

有效期:3個月

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實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
公司產品僅用于科研

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