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參考價	面議

產(chǎn)品簡介

供貨周期	現(xiàn)貨	規(guī)格	125mL×4
主要用途	僅供科研實(shí)驗(yàn)	產(chǎn)品濃度	1×

H4細(xì)胞專用培養(yǎng)基的相關(guān)產(chǎn)品：大鼠腎上皮細(xì)胞　小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基AML-12小鼠正常肝細(xì)胞　小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞 A3人T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基　小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基MHCC-97L人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基　小鼠腎成纖維細(xì)胞 U-2 OS人成骨肉瘤細(xì)胞　小鼠

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	產(chǎn)品形態(tài)
H4細(xì)胞專用培養(yǎng)基	125mL×4	液體

商品詳細(xì)介紹：

由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持H4細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含H4細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于H4細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品說明

產(chǎn)品形態(tài):液體

產(chǎn)品濃度:1×

產(chǎn)品規(guī)格:125mL×4

培養(yǎng)基成分:DMEM＋10% FBS＋1% P/S

細(xì)菌檢測:陰性

真菌檢測:陰性

支原體檢測:陰性

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn):細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

內(nèi)毒素含量(EU/mL):≤3

儲存條件:2~8℃，避光儲存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸

有效期:3個月

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

二、免疫熒光鑒定：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
公司產(chǎn)品僅用于科研