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小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1品牌
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  • 小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1品牌

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貨物所在地: 上海上海市
產(chǎn)地: 進口/國產(chǎn)
更新時間: 2023-07-03 09:41:24
期: 2023年7月3日--2027年1月13日
已獲點擊: 135
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(聯(lián)系我們,請說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,謝謝?。?/p>

產(chǎn)品簡介

小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1品牌公司專業(yè)代理ATCC以及國家保藏機構(gòu)提供的細(xì)胞,品系多樣,我司擁有專業(yè)的科研人員長期進行細(xì)胞培養(yǎng)和相關(guān)實驗,現(xiàn)已掌握各類細(xì)胞生長特性和生長條件。具體的說明書和價格可咨詢我司索取。

詳細(xì)介紹

小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1品牌本公司專業(yè)代理ATCC細(xì)胞,提供售前售后服務(wù),若要獲取詳細(xì)的說明書或價格信息,請。
細(xì)胞名稱  小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1品牌
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

生長特性 懸浮生長

特征特性 該細(xì)胞系是 P3X63Ag8細(xì)胞的非分泌型克隆,可合成Kappa鏈但不分泌,表達H-2d,不需HAT。

培養(yǎng)條件 DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS  

傳代方法 保持細(xì)胞密度在1×105~1×106 viable cells/ml之間,每周換液2~3次

傳代情況 C2

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測 培養(yǎng)法(-) 

STR -

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類

小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1品牌操作流程:

※主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡),co2孵箱。
※細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
 ?細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng):從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,同時不斷搖動使之迅速融化,然后用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
 ?細(xì)胞傳代:原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞。
 ?細(xì)胞形態(tài)的觀察:在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
 ?生長曲線:取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
 ?細(xì)胞的貼壁率:指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
  ?細(xì)胞的計數(shù):常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。

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小鼠骨髓瘤細(xì)胞;P3/NSI/1-Ag4-1品牌

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