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細胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)

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更新時間:2022-04-20 11:43:13瀏覽次數(shù):649

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20T/100T
貨號 FS-X9661 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅用于科研    
細胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)公司*的商品:突觸樣蛋白5亞型2抗體5,7-二氧芹菜定 DIMETHOXYAPIGENINIDIN, 5,7-(SH)Human, Mouse
絲合并蛋白3抗體(腫瘤差異表達蛋白)5-羥-4’,7-二氧黃 DIMETHOXYAPIGENIN, 4',7-(RG)(PLEASE CALL)Human, Mouse
Smad核轉錄共抑制因子抗體DIVINYL-PR

詳細介紹

產品屬于:

中文名稱

英文名稱

產品規(guī)格

發(fā)貨周期

細胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)


20T/100T

1~3天

商品介紹:

工作原理:

在機體內部隨時都在發(fā)生著細胞的死亡。傳統(tǒng)上用顯微鏡來觀察細胞的死亡,其特征為核染色質的濃縮及碎片的形成。但是這種現(xiàn)象出現(xiàn)的很晚,時間也很短暫。凋亡的特征是內 源性核酸內切酶被激活,細胞自身的染色質或DNA 被切割,出現(xiàn)單鏈或雙鏈缺口,并產生 與 DNA 斷點數(shù)目相同的3’-OH 末端。末端脫氧核糖核酸轉移酶(Terminal deoxynucleotidyl Transferase)可以將標記的dUTP(DIG-dUTP)標記至 3’-OH 末端,DIG-dUTP 結 合在 DNA 斷點部位,可以通過生物標記的抗抗體(Anti-DIG-Biotin)反應后,再結合 鏈酶親和素-熒光素 CY3(SABC-CY3)。Cy3 在 554nm 激化,在 568-574nm 發(fā)射熒光,呈鮮紅色,從而可以在顯微鏡下觀察到著色的凋亡細胞。


保存條件:-20℃冰凍保存一年。

試劑盒內容:

1.標記緩沖液(Labeling Buffer)1ml

2.末端脫氧核糖核酸轉移酶(TdT,×20)20μl

3.DIG-dUTP(×20)20μl

4.封閉液(Blocking Reagent)4ml

5.生物素化抗抗體(× 100)20μl

6.SABC-CY3(× 100)20μl

7.Proteinase K(×200)50μl

8 抗體稀釋液 4ml
培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

叉頭框蛋白O3(FOXO3)elisa試劑盒英文名稱:FOXO3 ELISA Kit轉錄同源蛋白質CUX2抗體包裝1g

叉頭框蛋白M1(FOXM1)elisa試劑盒英文名稱:FOXM1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白146抗體包裝5g

叉頭框蛋白A2(FOXA2)elisa試劑盒英文名稱:FOXA2 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白147抗體包裝1g

層粘連蛋白β1(LAMβ1)elisa試劑盒英文名稱:LAMβ1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白158抗體包裝250mg

層粘連蛋白α1(LAMα1)elisa試劑盒英文名稱:LAMα1 ELISA Kit鈣粘附蛋白-11抗體包裝100g

補體因子D(CFD)elisa試劑盒英文名稱:CFD ELISA Kit核仁蛋白C23抗體包裝25g

補體因子B(CFB)elisa試劑盒英文名稱:CFB ELISA Kit皮膚相互作用蛋白2抗體包裝5g

補體成分5a受體1(C5aR1)elisa試劑盒英文名稱:C5aR1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框149抗體包裝25g

補體成分5a(C5a)elisa試劑盒英文名稱:C5a ELISA Kit碳化合物激結構域蛋白質抗體包裝5g

補體成分5(C5)elisa試劑盒英文名稱:C5 ELISA Kit尾側型同源轉錄因子1抗體包裝1g

補體成分4b(C4b)elisa試劑盒英文名稱:C4b ELISA Kit補體C1qTNF8鏈多肽抗體包裝5g

補體成分4a(C4a)elisa試劑盒英文名稱:C4a ELISA Kit21號染色體開放閱讀框62抗體包裝1g

補體成分4(C4)elisa試劑盒英文名稱:C4 ELISA Kit磷化胞漿型磷脂A2抗體包裝5g

補體成分3(C3)elisa試劑盒英文名稱:C3 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框46抗體包裝1g

補體3a(C3a)elisa試劑盒英文名稱:C3a ELISA Kit20號染色體開放閱讀框103抗體包裝25g

鯊魚弧菌Vibrio│carchariae 質量規(guī)格:HPLC>98%,標準品游離雌三試劑盒異鼠李-3-O-半乳糖苷;Isorha

假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質量規(guī)格:>97%,BR游離β絨毛膜促性腺激試劑盒茵芋堿;Skimmianine

沙門氏菌Salmonella│sp. 質量規(guī)格:含量測定幽門螺旋菌抗體試劑盒一枝蒿庚;Bullatine G;so
細胞凋亡檢測試劑盒IV(CY3)乙二胺四乙二鉀鹽

其他 乙二胺四乙鉀; EDTA二鉀鹽二水合物

英文名稱: EDTA-2K

其他英文名稱: Ethylenediaminetetraacetic acid dipotassium salt dihydrate;EDTA dipotassium salt dihydrate

產品規(guī)格: 超純,99%

包裝:100克/500克

CAS號:25102-12-9

C10H14N2O8K2•2H2O=404.45

級別:Ultra pure grade

含量:≥99.0%

pH(50g/L,25℃):4.0~5.0

澄清度試驗:合格

硫鹽:≤0.01%

氯化物:≤0.002%

重金屬:≤0.001%

鐵:≤0.001%

性狀:結晶性粉末。易溶于水,不溶于乙。熔點 272℃(分解)。25℃時5%的水溶液pH 4~5

用途:生化研究。絡合劑。食品抗氧劑。醫(yī)藥助劑

保存:RT

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 


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