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柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 10:32:12瀏覽次數(shù):289

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013402 應用領域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:eIF4E (Phospho-Ser209) Antibody
Stathmin 1 (Phospho-Ser16) Antibody
BRCA1 (Phospho-Ser988) Antibody

詳細介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒

50次

FS-P013402

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

Phospho-RSK2 (Tyr529) /FITC 熒光標記磷化核糖體S6激RSK2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 Synaptotagmin-4/FITC 熒光標記突觸結合蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Agrin 聚集蛋白抗體  0.1ml

Rabbit  Guinea pig IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml

GLP-1 (7-36) 胰高血糖樣肽-1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Goat IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗羊IgG  0.1ml

 Synaptotagmin-4/FITC 熒光標記突觸結合蛋白4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

HP-CagA-IgG(Human Helicobacter pylori cytotoxin-associated gene A protein IgG) ELISA Kit 人幽門螺桿菌細胞相關基因蛋白A-IgGMulti-class antibodies: 48T

 HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh MAVS 線粒體抗病毒信號MAVS蛋白抗體  0.2ml

CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit 人周期依賴性激5 96T

Rab27a RAM-11抗體 0.2ml

CYP11B2 固酮合成CYP11B2抗體 0.2ml

 HRG Beta1 Heregulin β蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse IgM/APC APC標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

G1switch 2 G0/G1期開關調(diào)節(jié)蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Annexin I 膜粘連蛋白 I抗體  0.1ml

 IL-29/IFNL1/FITC 熒光標記白細胞介29抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgG/Gold 膠體金標記的兔抗人IgG  0.5ml

 RELN(Reelin)/FITC 熒光標記絡絲蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
柑橘頑固病螺原體染料法熒光定量PCR試劑盒谷氨棒桿菌種屬: Corynebacterium│glutamicum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0141生長條件: 37℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

羽扇豆蒼白桿菌種屬: Ochrobactrum│lupini分離基物: Root nodule, Lupinus honoratus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 2生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

黑曲霉種屬: Aspergillus│niger提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 66生長條件: 24℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法

血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)ELISA試劑盒甲酯 95%鋅 Anhydrous 硝硫康唑(標準品)

血管性血友病因子(VWF)ELISA試劑盒7-甲基 98%3.5鋅 粒度 1~2μm舒尼替尼

血管舒緩激肽(BK)ELISA試劑盒己甲酯  Standard for GC,>99.5%(GC)3.5鋅 粒度 2~5μm舒尼替尼(標準品)

血管生長(ANG)ELISA試劑盒己甲酯  分析標準品,≥99.7% (GC)3.5鋅 粒度 6~10μm,防腐級蘋果舒尼替尼

血管生成抑制因子(Arresten)ELISA試劑盒(s)-(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)乙酰 99%氟 99%蘋果舒尼替尼(標準品)

血管生成樣蛋白4(ANGPTL4)ELISA試劑盒(+)-甲薄荷酯 97%氟化標準溶液 質分析標準溶液,1mg/ml 溶液舒洛芬

血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)ELISA試劑盒硫代硫鎂 超純級氟 Standard for GC ,≥99.6% (GC)他克莫司

血管生成受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨激2(Tie-2)ELISA試劑盒三氟酮甲酯 97%氟 CP他克莫司(標準品)

血管生成受體/含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨激1(Tie1)ELISA試劑盒N-甲基-3-吲哚乙 97%氟 分析標準品枸櫞他莫昔芬

血管生成4(ANG-4)ELISA試劑盒4-甲基庚 99%己丁酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)枸櫞他莫昔芬(標準品)

血管生成2(ANG-2)ELISA試劑盒甲基環(huán)己酮 98%己丁酯 ≥98%坦度替尼;MLN518

血管生成1(ANG-1)ELISA試劑盒4-甲基-3- 98%丁位十二內(nèi)酯 98%坦度替尼(標準品)

血管內(nèi)皮抑抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒(-)2,2′-(3α,8α-二氫-8H-茚并[1,2--d]噁唑 98%丁乙酯 99%替考拉寧

血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒2,2′-[(4,s)-4-基-2-噁唑啉] 97%異戊 98%替尼泊甙,替尼泊苷

血管內(nèi)皮粘附分子1(VCAM-1)ELISA試劑盒2,2′-[(4,s)-4-叔丁基-2-噁唑啉] 99%異戊 Standard for GC,>99%(GC)替尼泊甙,替尼泊苷(標準品)

血管內(nèi)皮生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒氮芥鹽鹽 98%異戊 ≥97%,Kosher富馬替諾福韋酯;泰諾福韋酯


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