化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
實驗外包:
1.基因組學：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉(zhuǎn)錄組學：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選
7.代謝組學：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型：原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
48T 0.1PCR管 | FS-02R6393 |
組成及試劑配制:
1、酶標板：一塊（96孔）
2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標記6個離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個樣品，必須設置N+2個提取， 多出的一個是PC（樣品制備陽性對照）， 一個是NC（樣品制備陰性對照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設置qPCR反應（20 μL體系，在樣品制備室進行） 10. 如果只做1次重復，則標記N+9個PCR管，其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品，1個用于PCR陰性對照，6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復，則反應設置數(shù)量相應增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
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PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
CysLTs(Human cysteinyl leukotrienes) ELISA Kit 人半胱氨酰白三烯Multi-class antibodies： 48T
Torc2/Crtc2 CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KCNE1L 鉀離子通道蛋白家族成員1樣蛋白抗體 0.2ml
EBv IgM(Human epstein-barr virus IgM) ELISA Kit 人EB病毒IgM 96T
Phospho-PDGFRA(Tyr988) 磷化血小板源性生長因子受體α 0.1ml
CEP97 中心體蛋白97kDa抗體 0.2ml
Torc2/Crtc2 CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
MCV(Human myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗突變型瓜波形蛋白抗體Multi-class antibodies： 48T
Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) 磷化KB抑制蛋白激α/β抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh MAGEA2 黑色瘤相關(guān)抗原2抗體 0.2ml
SP-R(Human substance P receptor) ELISA Kit 人P物質(zhì)受體 96T
Rho C RhoC抗體 0.1ml
CCL3 巨噬細胞炎性蛋白1α抗體 0.1ml
Phospho-IKK alpha/beta (Ser176/Ser180) 磷化KB抑制蛋白激α/β抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Goat IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗羊IgG 0.1ml
phospho-GARB1 (Ser434) 磷化γ1基丁受體GABAA Rβ1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ADM R 腎上腺髓質(zhì)受體抗體 0.1ml
Integrin alpha 4,beta 7(LPAM-1)/FITC 熒光標記整合α4β7抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗雞IgM 0.1ml
alpha-Synuclein/FITC 熒光標記核突觸蛋白-α抗體(C端)IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
雞源性核酸檢測試劑盒48T0.1PCR管牡丹皮Cortex Moutan
廣天仙子Wide sky?Fairy
陳皮炭Chen Pitan
人工虎骨Artificial?bones
白薇Bai Wei
全葉青蘭All Ye Qinglan
土鱉蟲（冀地鱉）Woodlouse?（Hebei?Eupolyphaga sinensis）
紫草（新疆紫草）Gromwell?（Lithospermum?Xinjiang）
黃根Huang Gen
猴棗Hou Zao
龜甲The tortoise shell
燈心草Rush
苦杏仁Bitter almond
預知子Fructus Akebiae
梧桐子Wu Tongzi
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