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詳細(xì)介紹
組織來源：肺組織
種屬來源：羊
細(xì)胞簡(jiǎn)介：成纖維細(xì)胞是肺間質(zhì)中含量豐富的細(xì)胞種類。這些成纖維細(xì)胞與普通的相似，但也有其的特征，例如具有很長(zhǎng)的偽足和細(xì)胞間的間隙連接。
肺成纖維細(xì)胞的主要功能為分泌肺泡隔基質(zhì)中的III型膠原，彈性蛋白以及蛋白多糖，也在肺部受損時(shí)擔(dān)任重要的修復(fù)和重建功能。肺部受傷后，在炎癥部位的一定程度的成纖維細(xì)胞積聚是肺部復(fù)原的關(guān)鍵步驟，過多或者不足的成纖維細(xì)胞聚集都會(huì)導(dǎo)致肺功能異常。
培養(yǎng)基：原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：長(zhǎng)梭狀細(xì)胞
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
羊肺成纖維細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2293 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
羊肺成纖維細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈長(zhǎng)梭狀細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人胸腺上皮細(xì)胞 | 大鼠胃黏膜上皮細(xì)胞 |
賴氨酰氧化相關(guān)蛋白2重組兔單克隆抗體 | AF350標(biāo)記的細(xì)胞分裂周期樣蛋白20抗體 |
人小腸平滑肌細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的補(bǔ)體C9a抗體 |
小鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的鈉氫通道蛋白抗體 |
大鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的甲狀腺激受體相互作用蛋白4抗體 |
兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體 |
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的SHKBP1蛋白抗體 |
小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的環(huán)指蛋白93抗體 |
大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的GDNF家族受體α3抗體 GFR α3 |
兔外周血巨噬細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的磷化細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體 |
小鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的賴氨酰氧化相關(guān)蛋白2抗體 |
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 | 羊肺成纖維細(xì)胞AF350標(biāo)記的eIF5A2蛋白抗體 |
兔軟骨細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的F-box蛋白家族FBXO31抗體 |
人小腸黏膜上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的RSF1蛋白抗體 |
兔羊膜上皮細(xì)胞 | AF350標(biāo)記的載脂蛋白D抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，請(qǐng)注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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