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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：霍山石斛PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013555
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Lectin/FITC 熒光標記抗凝集抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Snail/FITC 熒光標記抗Snail蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALAD δ氨基乙酰丙脫抗體 0.2ml
Rabbit horse IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的兔抗馬IgG 0.1ml
GSK-3 Beta (CT) 糖原合激-3β抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Snail/FITC 熒光標記抗Snail蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit 人磷酯酰肌醇特異性磷酯CMulti-class antibodies： 48T
Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷化泛連接NEDD4-2抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL5RA/CD125 白介-5受體α鏈抗體IL-5Rα 0.1ml
PI Ab-IgG/IgM(human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit 人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 96T
Prostaglandin dehydrogenase 1 前列腺脫氫1抗體 0.1ml
C5b-9 末端補體復合物抗體 0.2ml
Phospho-NEDD4L (Ser342) 磷化泛連接NEDD4-2抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey rabbit IgG/APC APC標記的驢抗兔IgG 0.1ml
GJA10 間隙連接蛋白10抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ASAP1/DDEF1 發(fā)育分化增強因子1抗體 0.1ml
IAA/FITC 熒光標記吲哚-3-乙抗體/植物生長抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgM/FITC FITC標記的兔抗猴IgM 0.3ml
PKB/AKT-1 /FITC 熒光標記蛋白激B抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
霍山石斛PCR試劑盒50次大腸埃希氏菌(大腸桿菌)種屬: Escherichiacoli安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 致瀉大腸埃希氏菌（EPEC）。血清型：O127：K63培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃
蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereu提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)谷氨培養(yǎng)基: 0108生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法
煙曲霉種屬: AspergillusfumigatusFresenius安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 15生長條件: 25-28℃
釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 啤酒培養(yǎng)基: 13生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法；-80℃冰箱凍結法；真空冷凍干燥法
U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA試劑盒基氫鈉 5.0 M in 1 M NaOH1,2-二溴 99%3-(>98%,BR)
T特異性鳥苷三(Tgtp)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 AR2-溴異丁乙酯 98%叔丁基-4-羥基甲(>98%,BR)
T受體(TCR)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 99.99% metals basis氧氟沙星 分析標準品，≥99.0% (HPLC)4,4'-聯(lián)吡啶(>98%,BR)
T急性母白血病相關抗原(TALLA-1/CD231)ELISA試劑盒硫鎂，七 AR,99.0%氧氟沙星 98%4,4-二羥基二砜(>98%,BR)
T活化連接蛋白(LAT)ELISA試劑盒硫鎂，七 GR,99.5%氫 CP，99%4,5-二熒光(>98%,BR)
T表面糖蛋白CD1a(CD1A)ELISA試劑盒無硫鎂 CPL- 99%4-溴異喹啉(>98%,BR)
TU3A蛋白(TU3A)ELISA試劑盒莫能霉鈉 97%L- ACS, ≥99.5%對溴氧乙(>95%,Ind Grade)
Trem樣轉(zhuǎn)錄因子1(TREML1)ELISA試劑盒甲丁酯 98%L- FCC, ≥99.7%, FG對基甲(>98%,BR)
Traf2結合蛋白(T2BP)ELISA試劑盒甲芐酯 96%L- 藥用級對乙氧基甲(>98%,BR)
Toll作用蛋白(TOLLIP)ELISA試劑盒4-異酯 98%唑靈 分析標準品4-羥基(>98%,BR)
Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒環(huán)己基異酯 98%唑靈 95%4-甲(>98%,BR)
Toll樣受體7(TLR7)ELISA試劑盒綠麥隆 分析標準品5-氮胞苷 98%對甲(>98.5%,BR)
Toll樣受體6(TLR6)ELISA試劑盒綠麥隆標準溶液 100μg/ml,u=4%2’-脫氧鳥苷 99%對甲氧基乙酮(>98%,BR)
Toll樣受體5(TLR5)ELISA試劑盒綠麥隆標準溶液 10μg/ml,u=6% 5-氟脫氧胞苷 98%4-甲氧基酚(>98%,BR)
Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒3,4-二異酯 97%維生A棕櫚酯 170 USP units /g對甲基肉桂(>98%,BR)
Toll樣受體3(TLR3)ELISA試劑盒2,4-二氧乙 97%DL-α-酚 96%4-甲基傘形酯-N-乙酰-b-D-氨基半乳糖苷(>98%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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