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詳細介紹
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細胞00μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入00微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入00微升5000～0000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時的藥物濃度(IC90)
中文名稱：TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)
英文名稱：Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
產品規(guī)格：20次|50次
發(fā)貨周期：1～3天
| 本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細胞凋亡檢測方法。對于待檢測的細胞或組織樣品，經過生物素標記和后續(xù)的DAB顯色等步驟，即可在普通光學顯微鏡下觀察到凋亡細胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。 |
試劑盒組分：
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀釋液(選用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀釋液———1ml
DAB顯色液A————————6ml
DAB顯色液B————————6ml
標記反應終止液——————6ml
細胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內切酶，這些內切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細胞凋亡時抽提DNA進行電泳檢測，可以發(fā)現180-200bp的DNA ladder?；蚪MDNA斷裂時，暴露的3'-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)標記的dUTP(Biotin-dUTP)，隨后和辣根過氧化物酶(HRP)標記的Streptavidin(Streptavidin-HRP)結合，最后在HRP的催化下通過DAB顯色來顯示凋亡細胞，從而可以通過普通光學顯微鏡檢測到凋亡的細胞，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細胞凋亡的原理。
本試劑盒有如下優(yōu)點：
(1)高靈敏度：背景染色極低，陽性染色強，可以在單細胞水平檢測到細胞凋亡，同時由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細胞凋亡。
(2)特異性好：TUNEL檢測時通常更容易標記凋亡細胞，而不容易標記壞死細胞。
(3)快速：僅需約2-3個小時即可完成。
(4)應用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細胞或懸浮細胞的凋亡情況。
TUNEL法特異性檢測細胞凋亡時產生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導的DNA斷裂(和細胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會把射線等誘導發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細胞判斷為凋亡細胞。
極少數細胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細胞中也發(fā)現TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴格判斷細胞凋亡的情況下，最好同時檢測多個凋亡指標。
儲存條件：-20℃。
注意事項：
1、本試劑盒僅供科學研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，避免開蓋時試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融，否則將會增加空白吸收，從而影響檢測結果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時間的長短根據細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，對于大多數情況孵育 1 小時即可，白細胞需要培養(yǎng)較長時間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
微管相關蛋白1A/1B輕鏈3B(MAP1LC3B)elisa試劑盒英文名稱：MAP1LC3B ELISA Kit磷酸化β抑制蛋白1抗體包裝1g
微管蛋白β3(TUBB3)elisa試劑盒英文名稱：TUBB3 ELISA Kit磷酸化有絲分裂激酶A抗體包裝25g
網膜素(omentin)elisa試劑盒英文名稱：omentin ELISA Kit磷酸化APS抗體包裝5g
晚期糖基化終末產物(AGEs)elisa試劑盒英文名稱：AGEs ELISA Kit有絲分裂激酶A抗體包裝1g
脫氧膠原吡啶交聯(DPD)elisa試劑盒英文名稱：DPD ELISA Kit干擾素誘導蛋白AIM2抗體包裝25g
脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa試劑盒英文名稱：DPD ELISA Kit通道蛋白-2抗體包裝5g
脫氫表雄酮硫酸酯(DHEA-S)elisa試劑盒英文名稱：DHEA-S ELISA Kit腫瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶結合蛋白抗體包裝25ml
脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)elisa試劑盒英文名稱：DHEA-S7 ELISA KitADP核糖基化因子樣11抗體包裝5ml
脫氫表雄酮(DHEA)elisa試劑盒英文名稱：DHEA ELISA KitARM重復X連鎖蛋白ARMCX3抗體包裝1g
褪黑素(MT)elisa試劑盒英文名稱：MT ELISA KitARM重復X連鎖蛋白ARMCX1抗體包裝5g
突觸融合蛋白2(STX2)elisa試劑盒英文名稱：STX2 ELISA KitARM重復X連鎖蛋白ARMCX2抗體包裝25g
突觸融合蛋白1A(STX1A)elisa試劑盒英文名稱：STX1A ELISA Kit自噬相關蛋白10抗體包裝25g
透明質酸結合蛋白(HABP)elisa試劑盒英文名稱：HABP ELISA Kit?；Y合結構域蛋白6抗體包裝5g
透明質酸(HA)elisa試劑盒英文名稱：HA ELISA Kit氨基?；?抗體包裝25g
銅藍蛋白(CP/CER)elisa試劑盒英文名稱：CP/CER ELISA Kit脂肪甘油三酯脂酶抗體包裝5g
脂聯素受體2抗體激肽釋放酶3(KLK3)Torin 2 是一種 mTOR 抑制劑，抑制內 mTOR 活性，EC50 為 0.25 nM，比作用于 PI3K (EC50: 200 nM) 選擇性高
TUNEL細胞凋亡檢測試劑盒(顯色法)中性氧化鋁
其他 層析氧化鋁；α-氧化鋁，三氧化鋁
英文名稱： Alumina
其他英文名稱： Aluminum oxide
產品規(guī)格： FCP，100-200目
包裝：500克
產品規(guī)格： FCP，200-300目
包裝：500克
CAS號：1344-28-1
Al2O3=101.96
級別：FCP
目數：100-200目
pH(100g/L，25℃)：6.5～7.5
活度：合格
水溶解物：≤0.5%
灼燒失量：≤8.0%
干燥失量：≤1.0%
顆粒度：≥75.0%
目數：200-300目
顆粒度：≥70.0%
性狀：粉末。含有硫酸鈣粘合劑。緩慢地部分溶于堿性水溶液,幾乎不溶于水。
用途：生化研究。薄層色譜吸附劑
保存：RT
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