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詳細介紹
組織來源：外周血
種屬來源：人
細胞簡介：自然殺傷細胞(natural killer cell ， NK)是機體重要的免疫細胞 ，不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節(jié)有關 ，而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病 的發(fā)生。一種穩(wěn)定表達在NK和LAK細胞表面的LAK-1分子 ， 120kDa ， NK細胞在 IL-2條件下培養(yǎng)20天LAK-1仍為陽性 ，而HNK-1(CD57) 和CD16部分消失。 LAK 的殺傷活性可被抗LAK-1 McAb所抑制。
自然殺傷細胞刺激因子 (natural killer cell stimulatory factor,NKSF) 對NK細胞 有刺激作用。 IL-2、 IL-12、 IFN-α、TNF-α以及白細胞調節(jié)素(leukoregulin,LR) 對NK細胞的活化和分化有正調節(jié)作用 ， 體外培養(yǎng)時加入上述細胞因子可明顯提 高NK的殺傷活性。前列腺素 (PG)E1、 E2、 D2和腎上腺皮質激素等對NK細胞的 活性有抑制作用。
培養(yǎng)基：原代NK細胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：懸浮培養(yǎng)
傳代特性：根據細胞特性傳代
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣 ，95%； CO2 ， 5%
一、細胞基本屬性
產品名稱 | 產品規(guī)格 | 商品貨號 |
人NK細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | A01X1447 |
二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片
三、使用方法
人NK細胞是一種懸浮培養(yǎng)細胞，細胞形態(tài)呈，在技術部標準操作流程下，細胞可傳2-3代；建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶內；
4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預熱)。
5)原瓶內貼壁細胞按正常消化處理。
4. 細胞實驗
因原代細胞貼壁特殊性，貼壁的原代細胞在消化后轉移至其他實驗器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時，需要對實驗器皿進行包被，以增強細胞貼壁性，避免細胞因沒貼好影響實驗；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。
公司正在出售的產品：
兔視網膜色素上皮細胞 | 兔骨髓間充質干細胞 |
羰基還原1抗體 | 蛋白質磷2A （alpha + beta）抗體 |
大鼠氣管平滑肌細胞 | CD68抗體 |
兔肌腱干細胞 | 細胞骨架相關蛋白2抗體 |
雞前脂肪細胞 | 干擾素-γ/IFN-γ抗體 |
人肺動脈成纖維細胞 | 磷化蛋白激C(T500)抗體 |
小鼠肺成纖維細胞 | 異質核糖核蛋白K抗體 |
豬成骨細胞 | 小鼠抗人CD19單克隆抗體 |
大鼠肺成纖維細胞 | CD163抗體 |
兔肺微血管內皮細胞 | 磷化真核翻譯起始因子4E抗體 |
雞外周血淋巴細胞 | TWIST蛋白抗體 |
人肺微血管平滑肌 | 人NK細胞磷化熱休克蛋白27抗體 |
小鼠支氣管上皮細胞 | 性磷樣蛋白2抗體 |
豬骨髓間充質干細胞 | 前列腺素F2a受體抗體PGF2αR |
大鼠支氣管上皮細胞 | 補體應答基因32抗體 |
四、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中，消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術部溝通；由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。
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