人甲狀腺成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品：大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞小鼠角膜成纖維細(xì)胞大鼠角膜成纖維細(xì)胞人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞大鼠脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞人腦成纖維細(xì)胞小鼠牙乳頭細(xì)胞大鼠牙乳頭細(xì)胞

人甲狀腺成纖維細(xì)胞

一、細(xì)胞基本屬性

 

培養(yǎng)基：原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系

傳代特性：細(xì)胞特性確定傳代

消化液：0.25%胰dan白酶

培養(yǎng)條件：氣相：  空氣，95%；CO2 ，5%

細(xì)胞簡(jiǎn)介：甲狀腺是脊椎動(dòng)物非常重要的腺體，  屬于內(nèi)分泌器官。在哺乳動(dòng)物它位于頸部甲 狀軟骨下方，氣管兩旁。人類(lèi)的甲狀腺形似蝴蝶。甲狀腺控制使用能量的速度、 制造蛋白質(zhì)、調(diào)節(jié)身體對(duì)其他荷爾蒙的敏感性。

甲狀腺有兩層被膜：  氣管前筋膜包繞甲狀腺形成甲狀腺鞘，稱(chēng)為甲狀腺假被膜;甲 狀腺自身的外膜伸入腺實(shí)質(zhì)內(nèi)，  將腺體分為若干小葉，即纖維囊，  又稱(chēng)甲狀腺真 被膜，  這是甲狀腺成纖維細(xì)胞的主要聚集場(chǎng)所。腺鞘與纖維囊之間的間隙內(nèi)有疏 松結(jié)締組織，血管，  神經(jīng)和甲狀旁腺等。
原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的思路：

取材--分離--培養(yǎng)--鑒定

首先將組織從機(jī)體中取出，經(jīng)胰dan白酶/膠原酶處理后分散成單細(xì)胞，再在合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使細(xì)胞繁殖到一定系數(shù)后進(jìn)行細(xì)胞鑒定。

實(shí)驗(yàn)步驟：

一、取7-10d雄性SD大鼠，頸椎脫臼處死,浸泡于75％乙醇消毒3-5min。

二、在超凈工作臺(tái)中，將大鼠斷頭置于玻璃培養(yǎng)皿中，打開(kāi)顱腔后取出全腦,放在盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中，去除小腦和間腦。

三、將大腦半球在干濾紙上緩慢滾動(dòng)以去除軟腦膜和腦膜大血管，再放在新的盛有預(yù)冷的PBS玻璃培養(yǎng)皿中。

四、用細(xì)解剖鑷去除大腦白質(zhì)、殘余大血管和軟腦膜，保留大腦皮質(zhì)。

五、大腦皮質(zhì)放于DMEM中，剪碎成約1mm3大小，放入50ml的離心管中，加入混合酶液I(0.05-0 .1％II型膠原酶，0 .025-0 .05％IV型膠原酶，200-400U DNaseI)，混勻后37℃水浴消化1-1.5h。

六、室溫1 000×g離心8min，去上清液。

七、沉淀中加入20％BSA重懸浮，充分混勻，1 000×g，20min，4℃離心，去上清。

八、沉淀加入4ml混合酶液II( 0.05-0.1％的膠原酶/分散酶，0.05-0.1％I型膠原酶，100-300U DNaseI )重懸浮，混勻，37℃水浴消化0.5-1h，700×g室溫離心6min，去上清液。

九、沉淀加入2ml DMEM培養(yǎng)液懸浮混勻，鋪于經(jīng)離心形成連續(xù)梯度的12ml 50％Percoll(25 000×g，60min，4℃)，1000×g，4℃離心10min。

十、靠近底部的紅細(xì)胞層之上的白黃色的層面即為純化的微血管段，吸出后DMEM漂洗兩次(離心1000×rpm，6min，室溫)，去上清液。

加入DMEM培養(yǎng)液(20％FBS，4ug/ml素 )重懸浮，接種于含5％的大鼠 血清37℃孵育過(guò)夜所制備的細(xì)胞培養(yǎng)皿中，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)24h后更換不含素的混合培養(yǎng)基，隨后隔天換液。

注意事項(xiàng)：

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，yi酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪(fǎng)直至問(wèn)題得到解決。
公司正在出售的產(chǎn)品：