轉(zhuǎn)基因品系玉米NK603 PCR試劑盒注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系玉米NK603 PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點(diǎn)：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
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產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
服務(wù)流程：
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設(shè)計(jì)特異性引物和熒光探針（染料法只需設(shè)計(jì)引物）
2、抽提DNA、RNA，并對(duì)RNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄
3、實(shí)時(shí)熒光定量PCR
4、提供完整的實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告(檢測(cè)數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴(kuò)增曲線)
5、返還樣品（引物、RNA和cDNA）
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
細(xì)胞三磷酸肌醇（IP3）含量FR定量　WSB1 　100 ul

組織三磷酸肌醇（IP3）含量FR定量　WDR92 　100 ul

細(xì)胞鈣離子濃度比色法定量　WRNIP1 　20 ul

組織鈣離子濃度比色法定量　WDR46 　100 ul

體液鈣離子濃度比色法定量　WEE2 　20 ul

食物鈣離子濃度比色法定量　WDR5 　100 ul

環(huán)境鈣離子濃度比色法定量　WDR55 　100 ul

細(xì)胞鎂離子濃度化學(xué)比色法定量　WDR6 　20 ul

組織鎂離子濃度化學(xué)比色法定量　WDR18 　100 ul

飲料鎂離子濃度化學(xué)比色法定量　WDR21C 　20 ul

食物鎂離子濃度化學(xué)比色法定量　WDR61 　100 ul

環(huán)境鎂離子濃度化學(xué)比色法定量　WDR19/IFT144 　20 ul

細(xì)菌鎂離子濃度化學(xué)比色法定量　WDR20 　100 ul

酵母鎂離子濃度化學(xué)比色法定量　WDR7 　100 ul

細(xì)胞鎂離子濃度酶反應(yīng)光譜法定量　WDR40A 　100µl

組織鎂離子濃度酶反應(yīng)光譜法定量　WDR4 　100 ul
轉(zhuǎn)基因品系玉米NK603 PCR試劑盒Bacillus│subtilis提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)肌苷。培養(yǎng)基: CM0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Serratia│sp.分離基物: 土壤/森林樹下土提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

蘇云金芽胞桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 1-5cm土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 科研研究培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法

Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 遺傳工程培養(yǎng)基: 0033生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Tricholoma│matsutake提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 與赤松、黑松、高山松等形成外生菌根，食用，共生菌培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；礦物油法；定期移植法

Penicillium│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 活性物質(zhì)；抗炎培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)

Colletotrichum│orbiculare (Berk. & Mont.) Arx分離基物: 黃瓜葉片提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 26--30存儲(chǔ)條件: 定期移植法

德氏乳桿菌保加利亞亞種種屬: Lactobacillus│dbrueckii subsp. bulgaricus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于益生菌類食品。培養(yǎng)基: CM0006生長(zhǎng)條件: 42℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Rhizopus│stolonifer var. stolonifer提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 22℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。