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詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：質(zhì)粒pEGFP-N1 2μg
產(chǎn)品貨號：FS-P013340
產(chǎn)品規(guī)格：2μg
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
AIF ELISA Kit 大鼠凋亡誘導因子Multi-class antibodies： 48T
TEM8 血管內(nèi)皮標志物8抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Bovine IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的羊抗IgG 0.1ml
ALP-B(Mouse Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 小鼠骨特異性性磷B 96T
Phospho-NMDAR1(Ser896) 磷化谷受體1抗體 0.1ml
Beta-lactoglobulin β-乳球蛋白抗體 1ml
TEM8 血管內(nèi)皮標志物8抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
CK17(Human cytokeratin 17) ELISA Kit 人細胞角蛋白17Multi-class antibodies： 48T
HCG Beta 人絨毛膜促性腺β亞基單抗Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mitochondrial Pyruvate dehydrogenase kinase 1 丙酮脫氫激1抗體 0.1ml
sPLA2(Human secreted phospholipase A2) ELISA Kit 人分泌型磷脂A2 96T
RANKL 骨保護蛋白配體抗體(破骨細胞分化因子) 0.1ml
CHD1 ATP依賴的解旋CHD1抗體 0.1ml
HCG Beta 人絨毛膜促性腺β亞基單抗Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit mouse IgG-Fc/Cy5 Cy5標記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
GOLPH3 高爾基體外周膜蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AMPK gamma 1 腺苷活化蛋白激γ1抗體 0.2ml
Integrin- Alpha V/CD49e /FITC 熒光標記整合αV抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit horse IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗馬IgG 0.1ml
Shiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光標記抗豬腫病大腸桿菌志賀樣Ⅱ型突變體(O139菌株)抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
質(zhì)粒pEGFP-N1 2μg人前列腺E受體2（EP2）elisa檢測試劑盒
人前列腺性磷（ACP3/PAP）elisa檢測試劑盒
人抑制性蛋白（IAP）elisa檢測試劑盒
人粒巨噬集落因子抗體（GM-CSF Ab）elisa檢測試劑盒
人內(nèi)皮脂肪（EL/LIPG）elisa檢測試劑盒
人抗原6復合物基因座A（Ly6a）elisa檢測試劑盒
人磷脂酰肌醇蛋白聚糖4（GPC4）elisa檢測試劑盒
人膜橋蛋白elisa檢測試劑盒
人平滑肌肌球蛋白（SMM）elisa檢測試劑盒
人纖維蛋白原相關蛋白1（FGL1）elisa檢測試劑盒
人卵清蛋白特異性IgG（OVA sIgG）elisa檢測試劑盒
人囊性纖維化跨膜傳導調(diào)節(jié)因子（CFTR）elisa檢測試劑盒
人橋粒斑蛋白（DSP）elisa檢測試劑盒
人末端脫氧核糖核轉移（TDT）elisa檢測試劑盒
人基質(zhì)金屬蛋白原13 （Pro-MMP-13）elisa檢測試劑盒
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