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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：沙門氏菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013549
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Human Ubiquitin,Ub ELISA Kit 人泛蛋白Multi-class antibodies： 48T
SNAP-25 突觸相關(guān)蛋白25抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/Bio 生物標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
C3a ELISA Kit 大鼠補(bǔ)體片斷3a 96T
NCS1 神經(jīng)鈣傳感蛋白1抗體 0.2ml
BST1 骨髓基質(zhì)干細(xì)胞抗原1抗體 0.2ml
SNAP-25 突觸相關(guān)蛋白25抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基質(zhì)金屬蛋白2/明膠AMulti-class antibodies： 48T
OPGL/ODF 骨保護(hù)蛋白配體抗體(破骨細(xì)胞分化因子)Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh ICOS/CD278 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體 0.2ml
PAI ELISA Kit 大鼠纖溶原激活物抑制因子 96T
Protamine 2 魚精蛋白2抗體 0.2ml
C17orf74 17號染色體開放閱讀框74抗體 0.2ml
OPGL/ODF 骨保護(hù)蛋白配體抗體(破骨細(xì)胞分化因子)Multi-class antibodies： 0.1ml
Donkey rabbit IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的驢抗兔IgG 0.1ml
GCHFR GTP環(huán)反饋調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Artemin Artemin抗體 0.2ml
CD54/ICAM-1/Biotin 生物標(biāo)記細(xì)胞間粘附分子-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Monkey IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗猴IgG 0.3ml
PKC alpha/FITC 熒光標(biāo)記蛋白激C α抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
沙門氏菌通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium sp提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
粘質(zhì)沙雷氏菌種屬: Serratia│marcescens提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: quality control strain培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
地衣芽孢桿菌種屬: Bacillus│licheniformis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 598生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
β位淀粉樣前體蛋白裂解1(BACE1)ELISA試劑盒乙二叔丁 99%氟化，二 CP軟海綿(>95.0%,BC)
β-微精原蛋白(MSMB/PRSP)ELISA試劑盒乙二單己 98%氟化，二 AR軟海綿鈉(>95.0%,BC)
β-微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒烯異辛酯 >99.0%(GC)氟化，無 GR，粉末鄰二甲酐(>98%.BC)
β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒乙二丁 CP，98.5%鈉 GR，99.5%結(jié)晶碳(>98%,BR)
β羥丁(β-OHB)ELISA試劑盒烯羥酯 97%氟化鈉 99.99% metals basis焦(>97%,BC)
β葡萄糖苷(βGD)ELISA試劑盒甲基烯羥乙酯 98%氟化鈉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.93%鎢二(>98%,BR)
β葡萄糖苷(β-glucosidase)ELISA試劑盒甲基烯羥乙酯 96%氟化鈉 SP對甲磺酰(>98%,BR)
β葡糖苷(β-glucosidase)ELISA試劑盒硫羥 CP,97.0%氟化鈉 PT硫奎寧合物(>98%,BR)
β內(nèi)酰抑制劑(BLI)ELISA試劑盒烯羥乙酯 97%(含200-300ppmMEHQ穩(wěn)定劑)氟化鈉 ACS, ≥99%鈉(> 98%,BC)
β內(nèi)酰(β-lactamase)ELISA試劑盒正己 AR，97%氟化鈉 AR，98%次鈉溶液
β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA試劑盒甲基烯羥酯 97%氟化鈉 昆蟲培養(yǎng)級, ≥99%氫二鈉十二(>98%,BR)
β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒異辛 AR,97%縮節(jié) 分析標(biāo)準(zhǔn)品鎢鈉(>98%,BC)
β萘酚(β-Nph)ELISA試劑盒異辛 for HPLC, >97% (GC)縮節(jié) 98%硬脂鈉(>95%,BR)
β萘酚(β-naphthol)ELISA試劑盒異 Standard for GC,>99%(GC)阿斯巴甜 98%硫代硫鈉無(>98.5%,BC)
β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(β-Cat)ELISA試劑盒異 >98.0% (GC)(含100ppm BHT穩(wěn)定劑)1,2,3,4-丁四羧 99%Sulfo NHS LC Biotin
β-連環(huán)蛋白(CTNNB1/CTNNB/OK/SW-cl.35/PRO2286)ELISA試劑盒異 CPDL-蘋果 CP，99%Sulfo NHS SS Biotin
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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