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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：禽白血病病毒通用RT-PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013509
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
LAT/FITC 熒光標(biāo)記T細(xì)胞活化連接蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Spectrin- Alpha/FITC 熒光標(biāo)記血影蛋白/收縮蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIM1L 黑色瘤缺失樣蛋白1抗體 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
GMPR1 鳥苷還原1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml
Spectrin- Alpha/FITC 熒光標(biāo)記血影蛋白/收縮蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit 人肌球蛋白重鏈Multi-class antibodies： 48T
Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷化P63抑制基因抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HSD17B1/HSD17 羥類固醇脫氫17β抗體 0.1ml
EBMZ(Human epidermal basement membrane zone) ELISA Kit 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體 96T
PRRSV M protein 豬藍(lán)耳病病毒M蛋白抗體 1ml
CLN5 神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5抗體 0.2ml
Phospho-p63 (Ser160/Ser162) 磷化P63抑制基因抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Mink IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
GADL1 谷脫羧樣蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARHGAP20 Rho GTP激活蛋白20抗體 0.2ml
IKB alpha(phospho S32 + S36)/FITC 熒光標(biāo)記磷化KB抑制蛋白α抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
Phospho-PLK1 (Thr210)/FITC 熒光標(biāo)記磷化絲/蘇蛋白激Plk1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
禽白血病病毒通用RT-PCR試劑盒50次黃麻鏈霉菌種屬: Streptomyces│corchorusii提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生代謝產(chǎn)物具有抑菌活性培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
泡盛曲霉種屬: Aspergillus awamori提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 淀粉，脂肪，檸檬，纖維，JISZ 2911-2000 t培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
粟酒裂殖酵母種屬: Schizosaccharomyc│pombe提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 酒精、粟米酒、葡萄酒培養(yǎng)基: 13生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 測定(G+C) mol%標(biāo)準(zhǔn)對照菌。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
高爾基蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒3-異丁基-1-甲基 99%異硫熒光 96%舒緩激肽三醋鹽
高半胱氨(Hcy)ELISA試劑盒浸鏡油 高紫外滲透型二乙熒光 97%α-促黑,黑皮質(zhì)
剛地弓形蟲(T.gondii)ELISA試劑盒鹽林可霉 95%3-甲 99%內(nèi)皮-1，人，豬
干因子受體(SCFR)ELISA試劑盒美伐他汀 96%3-甲 98%蛙皮,胃泌
干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒制霉菌 ≥4,400 USP units/mg4- 98%血管活性腸肽
干生長因子(SCF)ELISA試劑盒萘酚AS-D-乙酯 98%二硫化四乙基秋蘭姆 97%焦碳二乙酯
干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)ELISA試劑盒還原型輔I二鈉鹽 98%雄烯二酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99%DEPC;焦碳二乙酯(sigma)
干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒β-煙酰腺二核苷鈉鹽 97%（法)雄烯二酮 99%瓊脂糖(Biowest,電泳級);西班牙瓊脂糖
干擾誘導(dǎo)T趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒N-辛?；?N-甲基葡糖 99%蘆薈甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%烯酰(超純)
干擾調(diào)節(jié)因子8(IRF8)ELISA試劑盒n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 97%蘆薈甙 97%聚乙二400
干擾調(diào)節(jié)因子3(IRF3)ELISA試劑盒n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 98%，用于蛋白分析牛蒡子苷元 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% 消膽樹脂;考來烯
干擾調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒吩硫甲酯 98%牛蒡子苷元 ≥98% (HPLC)蔗糖
干擾活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒6-葡萄糖三鈉鹽 99%積雪草苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%D-海藻糖二
干擾a-抗體(Anti-IFN-ab)ELISA試劑盒普卡 BC黃芪皂苷 III 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%
桿狀病IAP重復(fù)包含蛋白2/3(BIRC2/3)ELISA試劑盒釕紅 95%黃芪皂苷 II 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%鹽胍
肝脂(HL)ELISA試劑盒釕紅 36%，電鏡土木香內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%(HPLC)側(cè)金盞花,阿東糖,核糖
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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