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猴免疫缺陷病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 11:02:15瀏覽次數(shù):235

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013435 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
猴免疫缺陷病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:人生長調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生長刺激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒規(guī)...基質(zhì)膠體法小鼠胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒
羥基吳茱萸堿CAS:1238-43-3基質(zhì)膠體法大鼠胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒
9000-59-3蟲膠膠原蛋白酶消化試劑盒
流產(chǎn)布魯氏菌探針法熒光定量PCR試劑盒干細(xì)胞成脂分化潛力定性染色試劑盒

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

猴免疫缺陷病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013435

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

LIFR/FITC 熒光標(biāo)記抗白血病抑制因子受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 STK/CK II Alpha/FITC 熒光標(biāo)記絲/蘇蛋白質(zhì)激抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh AE2/SLC4A2 陰離子交換蛋白2抗體  0.2ml

Rabbit  Goat IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml

G protein alpha G蛋白α抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  dog IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗狗IgG  0.1ml

 STK/CK II Alpha/FITC 熒光標(biāo)記絲/蘇蛋白質(zhì)激抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

PON(Human paraoxonase) ELISA Kit 人對氧磷Multi-class antibodies: 48T

 NHE1 鈉氫通道蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh IL-16/LCF 白介-16抗體  0.1ml

IL-2sR Alpha/CD25 ELISA Kit 大鼠白介2可溶性受體α鏈 96T

PTPRA 酪磷α抗體 0.2ml

CDC42 細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體 0.1ml

 NHE1 鈉氫通道蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  rat IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗大鼠IgG 0.3ml

GIMAP6 GTPIMAP家族成員6抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Apg12 自噬相關(guān)蛋白12抗體  0.2ml

 IL-16/FITC 熒光標(biāo)記白介16抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human sIgA/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人分泌型IgA  0.1ml

Rabbit  human sIgA/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人分泌型IgA抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
猴免疫缺陷病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒龜裂鏈霉菌種屬: StreptomycesrimosusSobinetal.安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)土霉培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃

多粘類芽孢桿菌種屬: Paenibacillus│polymyxa提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

凝結(jié)芽孢桿菌種屬: Bacillus│coagulans分離基物: 乳制品提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)糖苷解抑制物、產(chǎn)L(+)乳培養(yǎng)基: 348生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

嗜滲正青霉種屬: Eupenicillium│osmophilum分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0072生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

沙眼衣原體抗體(CT)ELISA試劑盒正癸 98%乙葉酯 98%卡格列凈;坎格列凈

沙眼衣原體蛋白樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒琥珀二乙酯 98%乙葉酯 ≥98%, FCC, FG駢三氮唑(BTA,1,2,3-駢三氮唑)

沙眼衣原體(CT)ELISA試劑盒琥珀二乙酯 99%反式-2-己烯 97%鹽倍他司汀

沙漠猬因子(DHH)ELISA試劑盒琥珀二乙酯 standard for GC, ≥99.6% (GC)正己 98%鹽倍他司汀(標(biāo)準(zhǔn)品)

殺傷凝集樣受體(KLR)ELISA試劑盒癸二二乙酯 98%正庚 97%甲磺倍他司汀

殺傷球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒癸二二乙酯 standard for GC正庚 standard for GC, ≥98% (GC)胰島(豬)

/通透性增加蛋白(BPI)ELISA試劑盒癸 97%反-2-己烯  99%氧化鉍

B(CecB)ELISA試劑盒癸 ≥95%, FCC, Kosher 己葉酯 98%2--1,3-

(cecropin)ELISA試劑盒二氫 99%反式-2-己烯 98%富馬比索洛爾

色上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒二氫 Kosher, FCC, ≥99%反式-2-己烯 ≥98%, FCC, FG鹽溴己新

色氨酰tRNA合成(WARS)ELISA試劑盒二芐 97%反-3-己烯-1- 97%鹽布因

色氨羥化(TPH)ELISA試劑盒二芐 ≥98%, FCC惕各葉酯 97%鹽布因(標(biāo)準(zhǔn)品)

三角形四肽重復(fù)蛋白1(TTC1/TPR1)ELISA試劑盒正癸 ≥98%, FCC, FG惕各葉酯 97%,Kosher鹽布替萘芬

狀腺原氨(T3)ELISA試劑盒癸 natural, ≥92%2-辛基環(huán)戊酮  98%卡托普利

軟骨糖蛋白39(HC gp-39)ELISA試劑盒庚乙酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2-己基環(huán)戊酮 98%卡托普利(標(biāo)準(zhǔn)品)

軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)ELISA試劑盒庚乙酯 CP,97%甲葉酯 97%卡比多巴


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