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詳細介紹
商品介紹：
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit 是基于CFDA, SE對細胞進行示蹤及增殖檢測的試劑盒，由CFDA,SE粉末、溶劑及相關細胞染色緩沖液組成，該試劑盒主要工作原理為：CFDA, SE具有細胞膜滲透性，本身不具有熒光發(fā)光性。當通過被動運輸穿透細胞膜進入活細胞后，可被胞漿內的酯酶催化生成羧基熒光素琥珀酰亞胺酯（carboxyfluorescein succinimidyl ester, CFSE），后者可發(fā)強烈的綠色熒光，不能穿透細胞膜，能完好的保留在胞內。CFSE還可自發(fā)性并不可逆地與細胞內的氨基結合從而偶聯(lián)到細胞蛋白質上，同時過量且未被偶聯(lián)的CFDA, SE通過被動擴散回到細胞外培養(yǎng)基內，被后續(xù)清洗步驟所清除。經CFDA, SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定，穩(wěn)定標記的時間可達數月，因此非常適用于細胞群落分析。 |
CFDA, SE標記細胞的熒光非常均一，優(yōu)于以前使用的其他細胞示蹤熒光探針如PKH26，并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均一。在細胞分裂增殖過程中，CFSE 標記熒光可平均分配至兩個子代細胞中，熒光強度變?yōu)橛H代細胞的一半，通過流式細胞儀（FL1通道）根據熒光強度的不同，可檢測出未分裂細胞，分裂一次（1/2的熒光強度），二次（1/4的熒光強度），三次（1/8的熒光強度），以及更多分裂次數的細胞。CFSA，SE可檢測分裂次數多達八次甚至更多。經CFDA, SE標記的細胞可用于體外和體內增殖研究，且具有不會使鄰近細胞染色的功能。CFDA, SE常用于淋巴細胞的增殖檢測，也可用于成纖維細胞，自然殺傷細胞，造血祖細胞等其他細胞的增殖檢測。
CFDA, SE標記細胞呈綠色熒光，Ex=494nm，Em=521nm，除了流式細胞儀檢測細胞增殖外，還可用熒光酶標板定量活細胞數目，或者用熒光顯微鏡進行均一染色的細胞示蹤觀察。
本品為CFDA，SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒，包含配制CFDA，SE儲存液所需的溶劑和細胞標記用的染色緩沖液，簡化了實驗前期準備工作。另，CFDA,SE標記細胞一般15min即可完成，對于不同細胞，需要自行摸索最佳標記時間。按照每個樣本的標記體積為2ml計算。
產品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
CFDA SE Cell Proliferation and Cell Tracking Kit | 500T | 1～3天 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
解整合金屬蛋白9(ADAM9)elisa試劑盒英文名稱：ADAM9 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白62抗體包裝250mg
解整合金屬蛋白8(ADAM8)elisa試劑盒英文名稱：ADAM8 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白64抗體包裝25g
結合珠蛋白(Hpt)elisa試劑盒英文名稱：Hpt ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白72抗體包裝5g
接觸蛋白1(CNTN1)elisa試劑盒英文名稱：CNTN1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白73抗體包裝100g
窖蛋白(CAV1)elisa試劑盒英文名稱：CAV1 ELISA Kit卷曲螺旋結構域蛋白74B抗體包裝25g
角質轉谷酰胺(TGM1)elisa試劑盒英文名稱：TGM1 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框25抗體包裝5g
角蛋白9(KRT9)elisa試劑盒英文名稱：KRT9 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框42抗體包裝100g
角蛋白18(KRT18)elisa試劑盒英文名稱：KRT18 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框44抗體包裝25g
膠質細胞系來源神經營養(yǎng)因子(GDNF)elisa試劑盒英文名稱：GDNF ELISA Kit19號染色體開放閱讀框48抗體包裝500g
腱蛋白樣蛋白2(CHRDL2)elisa試劑盒英文名稱：CHRDL2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框50抗體包裝100g
堿性鞘磷脂磷二酯(Alk-Smase)elisa試劑盒英文名稱：Alk-Smase ELISA Kit19號染色體開放閱讀框51抗體包裝25g
堿性成纖維細胞生長因子(FGF2)elisa試劑盒英文名稱：FGF2 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框52抗體包裝5g
剪接因子3B亞基3(SF3B3)elisa試劑盒英文名稱：SF3B3 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框55抗體包裝1g
間隙連接蛋白43(CX43)elisa試劑盒英文名稱：CX43 ELISA Kit19號染色體開放閱讀框56抗體包裝5g
間皮(MSLN)elisa試劑盒英文名稱：MSLN ELISA Kit19號染色體開放閱讀框57抗體包裝25g
: T63資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品脂肪結合蛋白4試劑盒羊蹄;Nepodin
米曲霉Aspergillus│oryzae 質量規(guī)格：> 99%,EP脂肪甘油三酯脂試劑盒異肥皂草苷;Isosaponarin
新城疫病毒Rubulavirus│Newcastle disease virus 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品脂肪分化相關蛋白試劑盒異七葉皂苷Ib;Isoescin Ib
細胞增殖與示蹤檢測試劑盒乙銨
其他 乙铔；醋銨；乙銨鹽；醋
英文名稱： Ammonium acetate
其他英文名稱： Acetic acid ammonium salt
產品規(guī)格： AR，98%
包裝：500克
CAS號：631-61-8
C2H7NO2=77.08
級別：AR
含量：≥98.0%
pH（50g/L，25℃）：6.5～7.5
澄清度試驗：合格
鈣：≤0.001%
還原高錳鉀物質：≤0.01%
硫鹽：≤0.002%
磷鹽：≤0.0005%
氯化物：≤0.0005%
鎂：≤0.0004%
水不溶物：≤0.005%
鐵：≤0.0005%
重金屬：≤0.0005%
硝鹽：≤0.001%
灼燒殘渣：≤0.005%
性狀：無色結晶。稍有乙氣味。極易潮解。易溶于水和乙,微溶于酮。水溶液呈弱性,0.5mol/L水溶液的pH為7.0。相對密度(d204)1.17。熔點114℃。致死量(小鼠,靜脈)1.8mG(NH+4)/20G。有刺激性。
用途：生化研究。用以配制緩沖液，測定鋁和鐵。從其他硫鹽分離硫鉛
保存：RT
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