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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：嗜水氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013500
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Phospho-LATS1 (Thr1079) /FITC 熒光標記磷化抑制基因LATS1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SPY /FITC 熒光標記抗spindly抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIF 調(diào)亡誘導因子抗體 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgM/Bio 生物標記的兔抗豚鼠IgM 0.3ml
GLP-2 胰高血糖樣肽-2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPY /FITC 熒光標記抗spindly抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PS(Human Prednisolone) ELISA Kit 人潑尼松龍Multi-class antibodies： 48T
M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮激-M2Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIF15 驅(qū)動蛋白家族成員15抗體 0.2ml
DHEA-S ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮酯 96T
PRSS3 腦胰蛋白3抗體 0.2ml
phospho-CDKN2A (Ser152) 磷化抑癌基因p16抗體 0.1ml
M2-PK (pyruvate Kinase M2) 丙酮激-M2Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Mink IgG/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗貂IgG 0.1ml
GPR 151 G蛋白偶聯(lián)受體151抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARA24 雄受體相關蛋白24抗體 0.2ml
IL-1R II /FITC 熒光標記白介1受體Ⅱ抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/FITC FITC標記的兔抗貂IgG 0.3ml
PP2Ac/FITC 熒光標記磷酯-2Ac抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
嗜水氣單胞菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次邊緣假單胞菌邊緣致病變種種屬: Pseudomonas marginalis pv. margnalis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: NB生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
青海擬諾卡氏菌種屬: Nocardiopsis│quinghaiensis分離基物: 鹽性土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: MA生長條件: 28C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
凝結(jié)芽孢桿菌種屬: Bacillus│coagulans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28-32℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
紅膜蛋白(EMP)ELISA試劑盒2,6-二硝 分析標準品, 用于環(huán)境分析無檸檬 CP, ≥99.0% (T)芹糖異甘草苷；異甘草苷芹糖
紅激因子(ESF)ELISA試劑盒2,4-二硝 CP檸檬,一 Standard for GC白屈菜紅(標準品）
橫紋肌輔肌動蛋白α(sm Actinin-α)ELISA試劑盒3-氨基吡唑 98%檸檬,一 ACS, 99.0-102.0%TAE684
亨廷頓相關蛋白1(HAP1)ELISA試劑盒4-(甲基)甲酰 98%檸檬鈉，二 AR,99.0%青蒿(標準品)
黑瘤衍生亮氨拉鏈額外核因子(MLZE)ELISA試劑盒3,4-二甲氧基酚 97%檸檬鈉，二 CP,98.0%防己諾林
黑色抗體(MC Ab)ELISA試劑盒3-羧基甲 97%二合檸檬鈉 GR澳茄新
黑色(MSH)ELISA試劑盒2-羥基-6-甲基煙 98%檸檬鈉，二 ACS, ≥99.0% (NT)五合硫金雀花/硫鷹爪豆(標準品)
黑色濃縮(MCH)ELISA試劑盒醋丁纖維 30-35%檸檬鈉，二 用于分子生物學, ≥99%（GC)五合硫金雀花/硫鷹爪豆
黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒醋丁纖維 35-39%4-甲氧基甲酰 97%N-甲基金雀花氫鹽
黑色瘤相關抗原D4(MAGED4/MAGED4B)ELISA試劑盒醋丁纖維 44-50%2-甲基-1,3- 99%辛弗林(標準品)
黑色瘤活性抑制蛋白(MIA)ELISA試劑盒醋丁纖維 50-54%納米羥基灰石 nanopowder,<100 nm particle size (BET), ≥97%辛弗林
黑色瘤標記物(MART/Melan-A)ELISA試劑盒2-氨基-8-萘酚-6-磺 90%，工業(yè)級硝鐿 99.9% metals basis辛弗林鹽鹽
核轉(zhuǎn)錄因子κBp65(NFκBp65)ELISA試劑盒1,5-二羥基萘 98% 氟化鐿 99.99% metals basis三尖杉寧(標準品）
核轉(zhuǎn)錄因子κB(NFκB)ELISA試劑盒4,4'-二乙烯二羧 96%硝鐿 99.99% metals basis吉莫斯特;吉(標準品)
核因子κB抑制物激β(IKK-β)ELISA試劑盒蓖麻油 >97.0%(T),>70%(GC)羅丹明6G 高純級，95%吉莫斯特;吉美
核因子κB抑制物激α(IKK-α)ELISA試劑盒1,3-酮二羧 97%安息香 99.5%蝙蝠葛諾林(標準品)
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