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詳細(xì)介紹
商品介紹：
在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，而在細(xì)胞凋亡早期，細(xì)胞膜中的磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)。Annexin V 是一種分子量為35~36kD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。將Annexin V 進(jìn)行熒光素FITC 標(biāo)記，以標(biāo)記了的Annexin V 作為熒光探針，利用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀可檢測細(xì)胞凋亡的發(fā)生。 |
碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細(xì)胞膜，但對凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞，PI 能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將Annexin V 與PI 匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細(xì)胞區(qū)分開來。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細(xì)胞凋亡檢測（不推薦用于檢測組織樣本）。
產(chǎn)品屬于：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit | 10T|20T|50T|100T | 1～3天 |
培養(yǎng)操作步驟：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
降鈣素原(PCT)elisa試劑盒英文名稱：PCT ELISA Kit淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體包裝250mg
降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)elisa試劑盒英文名稱：CGRP ELISA Kit淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體包裝1g
降鈣素(CT)elisa試劑盒英文名稱：CT ELISA Kit轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體包裝25g
堿性磷酸酶(ALP)elisa試劑盒英文名稱：ALP ELISA Kit卵巢、胎盤、前列腺、蛋白22抗體包裝5g
堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF/FGF2)elisa試劑盒英文名稱：bFGF/FGF2 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白33B抗體包裝1g
堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)elisa試劑盒英文名稱：bFGF ELISA Kit載脂蛋白C3抗體包裝5g
狀腺素抗體(TAb)elisa試劑盒英文名稱：TAb ELISA Kit凋亡增強(qiáng)核酸酶抗體包裝1g
狀腺素(T4)elisa試劑盒英文名稱：T4 ELISA Kit染色體脆弱性相關(guān)基因抗體包裝1g
狀腺球蛋白(TG)elisa試劑盒英文名稱：TG ELISA Kit磷酸化蛋白激酶B抗體包裝25g
狀腺過氧化物酶(TPO)elisa試劑盒英文名稱：TPO ELISA Kit銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)β鏈抗體包裝5g
狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)elisa試劑盒英文名稱：PTHrP ELISA Kit?；铣擅讣易?抗體包裝1g
狀旁腺激素(PTH)elisa試劑盒英文名稱：PTH ELISA Kit酸性磷酸酶樣蛋白2抗體包裝25g
種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)elisa試劑盒英文名稱：AFP ELISA KitAHNAK核蛋白2抗體包裝5g
基化酶(Methylase)elisa試劑盒英文名稱：Methylase ELISA Kit二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體包裝1g
己糖激酶(HK)elisa試劑盒英文名稱：HK ELISA Kitp53誘導(dǎo)蛋白5抗體包裝250mg
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體催乳素(PRL)Amlodipine苯磺酸鹽是長效鈣離子通道抑制劑。
Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒蔗糖酶
其他果糖苷酶；轉(zhuǎn)化酶；蔗糖轉(zhuǎn)化酶
英文名稱：Invertase from baker's yeast (S. cerevisiae)
其他英文名稱：β-D-Fructofuranosidase； β-D-Fructofuranoside fructohydrolase；Saccharase
產(chǎn)品規(guī)格：BR，200u/mg
包裝：250毫克/1克
CAS號：9001-57-4
級別：BR
活力：≥200units/mg
活力定義：One unit will hydrolyze 1.0 μmole of sucrose to invert sugar per min at pH 4.5 at 55°C
PH：4.0～5.5
PH：4.5
性狀：類褐色粉末
用途：生化研究
保存：-20℃
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