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CFDA,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒

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更新時間:2022-04-20 10:17:25瀏覽次數(shù):243

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1000T
貨號 FS-X9591 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
CFDA,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒公司*的商品:順式-1,3-戊二烯
順式-2-己烯
順式-3-己烯
順式-9-二十三烯
順式均二代乙烯
四硫富瓦烯
四乙二乙烯
萜品油烯
溴乙烯

詳細介紹

商品介紹:

CFSE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒是基于一種新型熒光探針CFDA SE的用于細胞增殖檢測和細胞熒光示蹤的檢測試劑盒。CFDA SE目前被廣泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine摻入等其它細胞增殖檢測方法。

基于CFDA SE熒光標記的細胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入、BrdU標記獲得的檢測結(jié)果*一致,但同時可以提供更多的細胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細胞群中有多少比例的細胞分裂了1次、2次或更多次數(shù),同時如果和其它熒光探針聯(lián)用,可以獲取不同分裂次數(shù)細胞的其它相關(guān)信息。

CFDA SE 的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,分子式為C29H19NO11,分子量為557.47。CFDA SE可以通透細胞膜,進入細胞后可以被細胞內(nèi)的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細胞內(nèi)蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結(jié)合反應(yīng),并標記這些蛋白。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時,即可充分標記細胞。被CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定,穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)個月。CFSE標記細胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,并且分裂后的子代細胞的熒光分配也更均勻。

由于CFDA SE標記細胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定,每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半,這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞,分裂一次的細胞(1/2的熒光強度),分離兩次的細胞(1/4的熒光強度),分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細胞。

CFDA SE標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。常用于淋巴細胞的增殖檢測,也可以用于成纖維細胞、NK細胞等其它細胞的增殖檢測,甚至還可以用于細菌增殖的檢測。
產(chǎn)品屬于:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

CFDA,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒

CFSE Cell Proliferation and Tracking Kit

1000T

1~3天

培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)elisa試劑盒英文名稱:PⅢNP ELISA Kitβ分泌酶抗體包裝5g

Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)elisa試劑盒英文名稱:PⅢNT ELISA Kit相關(guān)死亡促進因子Bad抗體包裝100ml

Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)elisa試劑盒英文名稱:HPCⅢ ELISA KitBax包裝25ml

Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)elisa試劑盒英文名稱:Col Ⅲ ELISA Kit程序性死亡配體2抗體包裝500ml

Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa試劑盒英文名稱:HELIX-Ⅱ ELISA Kit膽汁鹽輸出泵/ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運蛋白11抗體包裝1g

Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)elisa試劑盒英文名稱:CTX-Ⅱ ELISA Kitβ2微球蛋白抗體(單抗)包裝1g

Ⅱ型膠原(ColⅡ)elisa試劑盒英文名稱:ColⅡ ELISA Kit骨/軟骨蛋白多糖1抗體包裝5g

Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa試劑盒英文名稱:Col Ⅱ ELISA Kit染色體相關(guān)蛋白CAP抗體包裝1g

Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)elisa試劑盒英文名稱:PⅠCP ELISA KitBcl-2同源結(jié)構(gòu)域樣蛋白1抗體包裝250mg

Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)elisa試劑盒英文名稱:PⅠNP ELISA KitBcl2相關(guān)抗凋亡基因6抗體包裝10g

Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)elisa試劑盒英文名稱:CⅠCP ELISA Kit半乳糖轉(zhuǎn)移酶7亞基β1,4抗體包裝50g

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa試劑盒英文名稱:ⅠCTP ELISA KitBEN結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體包裝100g

Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)elisa試劑盒英文名稱:NTX ELISA Kit巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體包裝25g

Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)elisa試劑盒英文名稱:CTX-Ⅰ ELISA Kit癌相關(guān)蛋白1抗體包裝500g

Ⅰ型膠原(ColⅠ)elisa試劑盒英文名稱:ColⅠ ELISA Kit腦蛋白CG6抗體包裝1g

膽汁結(jié)合蛋白DDH2抗體促狀腺素胚胎因子(TEF)PX-478 是有抗癌活性的缺氧誘導(dǎo)因子-1α (HIF-1α) 抑制劑,對一些癌系 IC50 為 20-30 μM。
CFDA,SE細胞增殖與示蹤檢測試劑盒硬脂鈣

其他 十八鈣鹽;十八鈣;SCD潤滑劑

英文名稱: Calcium stearate

其他英文名稱: Octadecanoic acid calcium salt

產(chǎn)品規(guī)格: CP

包裝:250克/1公斤/5公斤

CAS號:1592-23-0

C36H70CaO4=607.02

級別:CP

含量(以Ca計):6.6~7.4%

干燥失重:≤3.0%

重金屬:≤0.004%

性狀:顆粒狀或脂肪性粉末。遇或堿分解。易溶于熱吡啶,微溶于熱乙、熱的植物油和礦油,幾乎不溶于水、、酮和冷乙。熔點179~180℃。

用途:生化研究。防水劑。潤滑劑。聚氯乙烯樹脂穩(wěn)定劑

保存:RT

 


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