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膠原酶III型

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更新時(shí)間:2022-04-20 14:34:31瀏覽次數(shù):300

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mg
貨號(hào) FS-X9753 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
膠原酶III型公司*的商品:小鼠α葡萄糖苷蒲公英甾(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ蒲公英甾乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠鈣/鈣調(diào)依賴(lài)性蛋白激2蒲黃(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse
小鼠蒲葵子(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1七葉膽苷XVII(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
大鼠肝脂七葉皂苷AHuman
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α七葉皂苷BHu

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬于:

中文名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

膠原酶III型

Collagenase III

100mg

1~3天

商品介紹:

本品為III型膠原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺細(xì)胞和胎兒細(xì)胞的制備。

本品來(lái)源于溶組織梭菌(Clostridium histolyticum),是一種酶粗提物,不僅含有膠原酶(更準(zhǔn)確的稱(chēng)法為梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能夠降解天然膠原和網(wǎng)狀纖維。還含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分別能夠有效水解結(jié)締組織和上皮組織細(xì)胞外基質(zhì)內(nèi)的其他蛋白,多糖和脂質(zhì),使得本品非常適用于組織消化。


膠原酶(Collagenase)是一種蛋白酶,一種肽鏈內(nèi)切酶,能夠特異性的識(shí)別Pro-X-Gly-Pro序列(該序列高頻率出現(xiàn)在膠原中,很少發(fā)現(xiàn)于其他蛋白中)并切割該序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之間的肽鍵。許多蛋白酶都能水解單鏈且變性的膠原多肽,但膠原酶是一種可以降解具有三股超螺旋結(jié)構(gòu)的天然膠原纖維的蛋白酶,這種膠原纖維廣泛存在結(jié)締組織內(nèi)。

目前商業(yè)化提供的細(xì)菌膠原酶主要根據(jù)膠原酶活性的差異,分為四種類(lèi)型:膠原酶I型,II型,III型和IV型,在應(yīng)用上有所偏向:

1)膠原酶I(Type I Collagenase):含有比較均勻的各種酶活力(包括膠原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮細(xì)胞、肝、肺、脂肪和腎上腺組織細(xì)胞的制備;

2)膠原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心臟、骨、肌肉、胸腺和軟骨等組織來(lái)源細(xì)胞的制備;

3)膠原酶III(Type III Collagenase):含有較低的蛋白酶活性,常用于乳腺細(xì)胞的制備;

4)膠原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰島細(xì)胞的制備,或者需要維持受體完整性的細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)。

分子量:68-130 kDa

激活劑:Ca2+、Zn2+

抑制劑:EDTA, EGTA,Cysteine, histidine, 2-mercaptoethanol, o-phenanthroline DTT, Hg2+, Pb2+, Cd2+, Cu2+, Zn2+, Not inhibited by DFP or serum

活力單位:在37℃,pH7.5 的條件下,5h內(nèi)水解膠原產(chǎn)生相當(dāng)于1μM L-亮氨酸的酶量定義為1個(gè)酶活力單位。

儲(chǔ)存條件:4℃避光,有效期兩年
培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

洛莫司汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Adenosine-5'-diphosphate disodium salt(ADPna)CD8抗體包裝1g

洛匹那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Adenosine 5'-(trihydrogen diphosphate)/ADP表面趨化因子受體2抗體包裝100g

洛索洛芬鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Saxagliptin monohydrate胱抑B/半胱蛋白抑制劑B抗體包裝25g

麻保沙星;馬波沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ganciclovir趨化樣蛋白抗體包裝5g

馬來(lái)地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ganciclovir角蛋白20抗體包裝100g

馬來(lái)吡汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 5,6-Dimethoxy-1-indanone鈣激活的中性蛋白2抗體包裝25g

馬來(lái)伏沙明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): PaeoniflorinCD45RO抗體包裝100g

馬來(lái)桂哌齊特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Paeoniflorin嗜中性??乖瑿D177抗體包裝25g

馬來(lái)那敏/撲爾敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Paeoniflorin鈣整合結(jié)合蛋白1抗體包裝5g

馬來(lái)曲美布汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Paeoniflorin21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框7抗體包裝100g

馬來(lái)噻嗎洛爾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Paeoniflorin磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g

馬來(lái)替加色羅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 5-Hydroxytryptophan磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g

馬來(lái)溴那敏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 5-HTP磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝1g

馬來(lái)依那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝5g

嗎多明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Rivastigmine tartrate磷化巨噬集落激因子受體抗體包裝25g

小單孢菌Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP色c氧化亞基5A,線粒體試劑盒土荊皮乙;Pseudolaric Ac

馬爾他布魯氏菌 生物Ⅰ型Brucella│melitensis BiovarⅠ 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品色c氧化Ⅵα亞基多肽1試劑盒塔拉薩敏;Talatisamine

: =LMG27494T=CGMCC1.12516T資源名稱(chēng): 芽孢八疊球菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)色C氧化試劑盒天麻;Gastrodin
膠原酶III型亞磷三乙酯

其他 三乙基亞磷酯;三乙氧基膦

英文名稱(chēng): Triethyl phosphite

其他英文名稱(chēng): Phosphorous acid triethyl ester

產(chǎn)品規(guī)格: AR,98%

包  裝: 100毫升

CAS號(hào):122-52-1

C6H15O3P=166.16

級(jí)別:AR

含量:≥98%

折光率:1.412~1.414

性狀:無(wú)色液體。對(duì)濕敏感。能與乙、 、混溶,不溶于水。相對(duì)密度0.9687。沸點(diǎn) 156.6℃。閃點(diǎn) 54℃。易燃。 有刺激性

用途:生化研究。有機(jī)合成。增塑劑。穩(wěn)定劑。潤(rùn)滑油脂的添加劑。

保存:RT

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 


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