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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：鴨瘟病毒PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013571
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Human histatin 5,HTN5 ELISA Kit 人富組蛋白Multi-class antibodies： 48T
Smad7 Smad 7抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/APC APC標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
AQP-5(Mouse Aquaporin 5) ELISA Kit 小鼠通道蛋白5 96T
NUP88 核孔復(fù)合體蛋白88抗體 0.2ml
Batroxobin Protein 蛇毒巴曲抗體 0.2ml
Smad7 Smad 7抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
E(Human estrogen) ELISA Kit 人雌Multi-class antibodies： 48T
lamin A 核纖層蛋白A抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL22 Kelch樣蛋白22抗體 0.2ml
OXR(Human Orexin receptor) ELISA Kit 人食欲受體 96T
Profilin 2 前纖維蛋白2抗體 0.1ml
CD2BP3 CD2結(jié)合蛋白3抗體 0.2ml
lamin A 核纖層蛋白A抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey Goat IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLT28D1 糖基轉(zhuǎn)移28家族1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASF1A 細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體 0.1ml
HSP-47/FITC 熒光標(biāo)記熱休克蛋白-47蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Phospho-Pin1 (Ser16)/FITC 熒光標(biāo)記磷化肽基脯氨酞順?lè)串悩?gòu)Pinl抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鴨瘟病毒PCR試劑盒50次非O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae non-O1提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分型血清 非O1 VBO-90培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
肉桂色曲霉種屬: Aspergillus│cinnamomeus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 糖化作用。培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Stigmatellaerecta種屬: Stigmatellaerecta分離基物: 楊樹皮，加拿大安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 169生長(zhǎng)條件: 30℃
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌檢測(cè)芯片培養(yǎng)基: 51生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
Ⅱ型前膠原羧基端肽(PⅡCP)ELISA試劑盒次硝鉍 AR,99.5%1H-咪唑-4-甲 98%葡萄糖-6-脫氫
Ⅱ型前膠原N端前肽(PⅡNP)ELISA試劑盒硝鉍 CP,99.0%三氟磺酐 98%戊二(>98%,BR)
Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA試劑盒次碳鉍 AR,90.0%3-溴 98%戊二酐(>96%,BR)
Ⅱ型膠原交聯(lián)C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒化鈣,二 AR并-15-冠-5 98%三醋甘油酯(>98%,BR)
Ⅱ型膠原代謝產(chǎn)物C2C(C2C)ELISA試劑盒無(wú)化鈣 AR,96.0%鄰二酚-O，O′-二乙 97%甘氨鈉(>98%,BR)
Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA試劑盒無(wú)化鈣 CP,96.0%1-(3-氨基基)吡咯 97%乙(>98%,BR)
Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA試劑盒無(wú)化鈣 ACS2-氧基溴乙 98%硬脂單甘油酯(>98%,BR)
Ⅱ型肺泡表面抗原(KL-6/MUC1)ELISA試劑盒無(wú)化鈣 99.99% metals basis代異丁 98%化金
Ⅰ型前膠原羧基末端前肽(PⅠCP)ELISA試劑盒檸檬,一 99.995% metals basis代正 99%石墨粉(>99%,BR)
Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA試劑盒尼泊金乙酯 AR,99%代正 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8% (GC)硝胍(分子生物學(xué)級(jí))
Ⅰ型前膠原氨基端肽(PⅠNP)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 AR代仲丁 99%己二(>98%，BR)
Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 99.99% metals basis1-代正戊 Standard for GC, ≥99.5% (GC)六甲基酰三(>98%,BR)
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 ACS, ≥99.0%1-代正戊 99%還原茚三酮二合物(>98%,BR)
Ⅰ型膠原羧基端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒硫亞鐵，七 for plant cell culture, ≥99%環(huán)戊乙 98%氫(>40%,BC)
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)ELISA試劑盒檸檬 CP,99.0%1,4-二丁 98%中粘度羥基纖維
Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒鈉石灰 醫(yī)用級(jí)，紅色2-羥基-4-甲氧基甲 98%3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷(>98%(TLC),BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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