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詳細(xì)介紹
組織來(lái)源：正常主動(dòng)脈組織
種屬來(lái)源：兔
細(xì)胞簡(jiǎn)介：主動(dòng)脈瓣施半月瓣，位于左心室和主動(dòng)脈之間，抑制射入主動(dòng)脈的血液回流入左心室。
主動(dòng)脈瓣鈣化可引起主動(dòng)脈瓣狹窄關(guān)閉不全等，施導(dǎo)致老年退行性心瓣膜病的重要病理改變，其發(fā)病率隨著年齡的增加而升高。有研究表明，瓣膜間質(zhì)細(xì)胞向城固細(xì)胞樣細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化有可能是主動(dòng)脈瓣膜鈣化的病理改變基礎(chǔ)之一
培養(yǎng)基：原代間質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：長(zhǎng)梭形，不規(guī)則細(xì)胞
傳代特性：根據(jù)細(xì)胞特性
消化液：0.25%胰dan白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
一、細(xì)胞基本屬性
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 商品貨號(hào) |
兔主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | A01X2040 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時(shí)發(fā)送細(xì)胞電子版照片
三、使用方法
兔主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞，細(xì)胞形態(tài)呈長(zhǎng)梭形，不規(guī)則細(xì)胞，在技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下，細(xì)胞可傳2-3代；建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1)吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2)添加0.25%消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后，吸出多余消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后，再加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)用吸管輕輕吹打混勻，按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞收貨脫落
1)收集所有細(xì)胞懸液，1000rpm，離心5min，保留沉淀；
2)添加0.25%消化液0.5mL至離心管中，重懸沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)；消化完向離心管內(nèi)加入5ml培養(yǎng)基終止消化；
3)經(jīng)1000rpm，離心5min，丟棄上清，用5ml培養(yǎng)基重懸沉淀，接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)；
4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后按照換液頻率更換新鮮的培養(yǎng)基(37℃預(yù)熱)。
5)原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
因原代細(xì)胞貼壁特殊性，貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿（如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等）時(shí)，需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被，以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性，避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗(yàn)；包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） ，多聚賴氨酸PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%），依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞 | 鴨胚胎成纖維細(xì)胞 |
2，4-二氯苯氧乙(除草劑)抗體 | PE-Cy5標(biāo)記的NXF2蛋白抗體 |
牛骨骼肌細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的線粒體核糖體蛋白L30抗體 |
牛脂肪干細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的RAN結(jié)合蛋白16抗體 |
牛骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的蛋白O巖藻糖基轉(zhuǎn)移2抗體 |
雞氣管上皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的精子形成相關(guān)凋亡蛋白7抗體 |
雞小腸黏膜上皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的卵母細(xì)胞表達(dá)蛋白OOEP抗體 |
雞輸卵管上皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的附睪分泌蛋白4抗體 |
雞真皮成纖維細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體 |
狗腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的神經(jīng)叢蛋白B3抗體 |
狗腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的CRB1蛋白抗體 |
狗軟骨細(xì)胞 | 兔主動(dòng)脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞PE-Cy5標(biāo)記的微管相關(guān)蛋白4抗體 |
狗皮下微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的鋅指蛋白197抗體 |
狗臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的膜粘連蛋白8抗體 |
兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞 | PE-Cy5標(biāo)記的宿主細(xì)胞因子2抗體 |
四、注意事項(xiàng)
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中，消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，詳盡告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。
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