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詳細(xì)介紹
操作規(guī)程：
1、在96孔板加入細(xì)胞00μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入00微升5000～0000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～0μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及00%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成× MTT 溶液。
5、每孔加50μL × MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加50μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×00
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 0%時(shí)的藥物濃度(IC90)
中文名稱：Propidium Iodide染色液(PI,碘化丙啶)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：100T
發(fā)貨周期：1～3天
PI染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測，也可用于普通的細(xì)胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色，染色后可用熒光顯微鏡檢測或流式細(xì)胞儀檢測。Propidium Iodide是一種DNA 結(jié)合性染料，其激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和630nm，產(chǎn)生紅色熒光，但無膜通透性，不能透過活細(xì)胞膜，只能染死細(xì)胞。因此，在熒光顯微鏡下觀察，正常細(xì)胞不能著色，早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光，晚期凋亡細(xì)胞紅光加強(qiáng)，壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。也可采用流式細(xì)胞儀利用細(xì)胞形態(tài)上的改變影響它們的光散射特性改變進(jìn)行分析，還可與RNase A結(jié)合進(jìn)行細(xì)胞周期分析。 |
儲(chǔ)存條件：4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。
有效期：六個(gè)月。
注意事項(xiàng)：
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用，不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融，否則將會(huì)增加空白吸收，從而影響檢測結(jié)果。最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性，則測定不含細(xì)胞，僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入 MTS ，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次，然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，對于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可，白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測，MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。
莪術(shù)二（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Graphite powderFBXO28蛋白抗體包裝5g
莪術(shù)呋喃二烯英文名稱： Hexylene glycolFBXW5蛋白抗體包裝1g
莪術(shù)烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： HMPA, hexamethylphosphoramideFBXW12蛋白抗體包裝5g
鵝不食草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Hydrindantin hydrateFBXO42蛋白抗體包裝1g
厄弗酚英文名稱： Hydroxypropyl celluloseFasL抗體包裝250mg
餓螞蝗（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Indoxyl-Gal原纖維蛋白1抗體包裝5g
蒽醌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Indoxyl-Glucuronide胰腺衍生因子抗體包裝1g
兒茶(兒茶)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Iodobenzene性成纖維生長因子抗體包裝5g
兒茶沒食子酯英文名稱： Iron (II) sulfide凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體包裝1g
二基庚烷A（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Iron (II,III ) oxide凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相關(guān)抗原抗體包裝1g
二羥茶堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Iron (III) oxideFas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白包裝5g
二氫丹參I（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ron powder reduced胰腺衍生因子抗體包裝100ml
二氫辣椒堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Isophorone補(bǔ)體因子H抗體包裝25ml
二氫獼猴桃內(nèi)酯,奇異果內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Isovanillin磷化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體包裝1g
二氫歐山芹當(dāng)歸酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： IsovanillinFas相關(guān)1因子抗體包裝5g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR上皮特異性抗原試劑盒去芹菜糖桔梗皂苷D;Deapio-pla
: DSM44492資源名稱: 擬諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%傷寒抗體試劑盒千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖苷
青霉屬菌Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%傷寒試劑盒千金子二萜二乙酰酰酯;5,15-D
Propidium Iodide染色液(PI,碘化丙啶)無水甜菜堿
其他甜菜；銨乙內(nèi)酯；甘胺內(nèi)鹽；基甘
英文名稱：Betaine
其他英文名稱：Methanaminium；2-(Trimethylammonio)ethanoic acid hydroxide inner salt； (Carboxymethyl)trimethylammonium hydroxide inner salt；Glycine betaine；Trimethylammonioacetate
產(chǎn)品規(guī)格：超純，99%
包 裝： 100克
CAS號：107-43-7
C5H11NO2=117.15
級別：Ultra Pure Grade
含量：≥99.0%
熔點(diǎn)：301～305℃
PH（25%，25℃，水溶液）：0.8～1.2
熔點(diǎn)：233～238℃
比旋光度：-68°～-72°
干燥失重：≤0.50%
重金屬：≤10ppm
性狀：結(jié)晶性粉末。溶于水,熱時(shí)更易溶解,有雜質(zhì)存在時(shí)溶解度顯著增加；極難溶于乙。易為稀無機(jī)水解得到腺嘌呤和D核糖。無氣味。微有咸苦味。對空氣、光敏感。在真空中加熱至110℃變?yōu)闊o水物。pH 2時(shí)大吸收波長257nm ,摩爾吸光系數(shù)14600
用途：生化研究。阿糖腺苷(Ara-AR)、腺苷三磷(ATP)、（COASH）及環(huán)磷腺苷（CAMP）等的主要原料
保存：2～8℃，避光
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