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人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒樣品操作及注意事項(xiàng)

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                 人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒樣品操作及注意事項(xiàng)
 

樣品收集、處理及保存方法

1、 血  清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2、 血  漿----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,1000×g離心30分鐘去除顆粒。

3、 細(xì)胞上清液--1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4、 組織勻漿---將組織加入適量生理鹽水搗碎,1000×g離心10分鐘,取上清液。

5、 保  存----如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-80 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾,不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

 
操作注意事項(xiàng)

1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀釋過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

3. 不用的其它試劑,應(yīng)包裝好或蓋好,不同批號(hào)的試劑不要混用,保質(zhì)前使用。

4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。

5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液,使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

7. 底物A易揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子,底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒,實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

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