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ELISA實(shí)驗(yàn)過程中除了選擇靈敏度高的ELISA試劑盒之外，處理樣本的方法也是不一樣的。ELISA實(shí)驗(yàn)中常見液體類樣本有血清、血漿、尿液、細(xì)胞上清、腦脊液等幾種。

一、ELISA樣本的保存

正常情況下，再5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4°C，標(biāo)本再冰箱中保存時間過長會導(dǎo)致血清IgG聚合，是間接法的試劑本底加深，超過一周測定的需-20°C保存，凍結(jié)血清溶解后，蛋白質(zhì)局部濃縮，分不均，應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡，

渾濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾，澄清后再檢測。

測抗體的血清的標(biāo)本如需保存作多次檢測，以少量分裝冰存，

保存血清只采集是就應(yīng)注意無菌操作，也可加入適當(dāng)?shù)姆栏瘎?，抗凝不wan全的標(biāo)本因纖維蛋白元的干擾而造成假陽性，建議勁量不使用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。

二、ELISA樣本處理

1、血清：室溫血液凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，如有沉淀形成，應(yīng)再次離心

3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成分時，用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）仔細(xì)收集上清，檢測細(xì)胞內(nèi)的成分時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右，通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成分。

5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量，加入一定量的PBS，PH7.4，用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?，?biāo)本融化后任然保持2-8°C的溫度，加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細(xì)收集上清，分裝后一份待檢測，其余冷凍備用，

6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行試驗(yàn)，若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20°C保存，單應(yīng)避免反復(fù)凍融。