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技術(shù)文章

ELISA試劑盒液體類標(biāo)本使用注意事項(xiàng)

閱讀:188          發(fā)布時間:2021-12-27

在收集標(biāo)本前必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成分是否足夠穩(wěn)定,我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測,對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的標(biāo)本,請及時儲存在4℃的條件下備用,如有特殊原因需要周期收集標(biāo)本,請在造模取材后,將標(biāo)本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保持。因冰室與室溫存在一定的溫差,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以請避免反復(fù)凍融。

液體類標(biāo)本:

包括血清,血漿,尿液,胸腹水,腦脊液,細(xì)胞培養(yǎng)上清液等。

1、血清:

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中如有沉淀,請再次離心。

2、血漿:

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,檸檬酸鈉或者肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,在離心20分鐘(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。

3、尿液:

用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。

4、細(xì)胞培養(yǎng)上清:

檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,當(dāng)細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并釋放細(xì)胞內(nèi)的成份,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,如保存過程中有沉淀,請再次離心。

5、組織標(biāo)本:

切割標(biāo)本后,稱取重量,加入一定量的PBS(PH7.4),用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?,?biāo)本融化后仍保持2-8℃的溫度,加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,分裝后留一份待檢測,其余冷凍備用。


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