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elisa試劑盒固相免疫測(cè)定的原理
閱讀：486 發(fā)布時(shí)間：2019-5-10 elisa試劑盒固相免疫測(cè)定的原理
基礎(chǔ)：抗原或抗體的固相化幾抗原或抗體的酶標(biāo)記。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，由此進(jìn)行定性或定量分析。
雙抗體夾心發(fā)
用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋，可直接用于測(cè)定，因此其敏感度相對(duì)高與間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBsAg的檢測(cè)常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，尋找合適的標(biāo)記方法。
間接法
間接法的優(yōu)點(diǎn)：只要變換包被抗原就可利用同一酶標(biāo)抗抗體建立檢測(cè)相應(yīng)抗體的方法。
競(jìng)爭(zhēng)法
小分子抗原或半抗原缺乏可作夾心法的兩個(gè)以上的位點(diǎn)，因此不能用雙抗夾心法進(jìn)行測(cè)定，可以采用競(jìng)爭(zhēng)法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上酶標(biāo)抗原愈少，后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等elisa測(cè)定多用此法。
俘獲發(fā)
IgM的檢測(cè)常用語傳染病的診斷。用人抗IgM抗體包被固相，以捕獲血清標(biāo)本中的IgM。此法常用于病毒性感染的早期診斷。
生物素-親合素法
固相支持物→ 故相抗原化→特異性IgG（待測(cè)物）→生物素化抗小鼠IgG（Biotin）→HRP-酶標(biāo)鏈親合素（Avidin）→底物及顯色劑→顯色和測(cè)定。