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ELISA試劑盒做好實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作
1、仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，確定試劑盒在有效期內(nèi)。
2、按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全，以及所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等。3、標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份，短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者，注意低溫保存。
4、按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑。
5、選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)，若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體，從同一家公司選擇抗體對(duì)。
6、一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的線(xiàn)性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml，可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類(lèi)試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。