呼吸道合胞病毒（RSV）感染是兒童住院的重要原因，也是全球1歲以下嬰兒死亡的主要原因之一。RSV屬于肺炎病毒屬，其基因組為單鏈、不分段的負(fù)義RNA，長(zhǎng)度約為15,200個(gè)核苷酸。病毒顆粒表面有三種蛋白：小疏水蛋白（SH）、附著蛋白（G）和融合蛋白（F）。G蛋白和F蛋白是主要的抗原蛋白。根據(jù)G蛋白的序列，RSV被分為A和B兩個(gè)亞群。

RSV-F蛋白是一種三聚體跨膜糖蛋白，介導(dǎo)RSV與細(xì)胞受體的結(jié)合，并誘導(dǎo)病毒包膜與細(xì)胞質(zhì)膜之間不依賴pH的融合。F糖蛋白在來(lái)自A和B亞群的RSV分離株中高度保守，氨基酸序列一致性超過(guò)90%。

Cell Biolabs的RSV融合蛋白ELISA試劑盒是一種酶免疫分析方法，用于檢測(cè)和定量RSV融合蛋白。ELISA抗體能夠識(shí)別A型和B型RSV的融合蛋白。該試劑盒的檢測(cè)靈敏度為156 pg/mL RSV-F。每套試劑盒提供的試劑足以進(jìn)行多達(dá)96次檢測(cè)，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線和RSV裂解樣本。

作為Cell Biolabs全國(guó)總代理，艾美捷科技強(qiáng)烈推薦Cell Biolabs熱銷產(chǎn)品呼吸道合胞病毒融合蛋白ELISA試劑盒。產(chǎn)品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

呼吸道合胞病毒融合蛋白ELISA試劑盒檢測(cè)原理

將抗RSV融合蛋白的單克隆抗體吸附在微孔板上。樣本或標(biāo)準(zhǔn)品中的RSV融合蛋白與吸附在板上的抗體結(jié)合；隨后加入FITC偶聯(lián)的抗RSV融合蛋白單克隆抗體，與被捕獲的RSV融合蛋白結(jié)合。經(jīng)過(guò)孵育和洗滌步驟后，加入HRP偶聯(lián)的抗FITC單克隆抗體，與FITC偶聯(lián)的抗RSV融合蛋白單克隆抗體結(jié)合。在洗滌步驟中去除未結(jié)合的HRP偶聯(lián)抗FITC抗體后，加入與HRP反應(yīng)的底物溶液。樣本中RSV融合蛋白的含量與生成的有色產(chǎn)物成正比。通過(guò)加入終止液終止反應(yīng)，并在450 nm處測(cè)量吸光度。通過(guò)RSV融合蛋白標(biāo)準(zhǔn)品制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，并據(jù)此確定樣本中RSV融合蛋白的濃度。

相關(guān)產(chǎn)品

1. VPK-108-H：QuickTiter?慢病毒定量試劑盒（HIV-1 p24 ELISA）  

2. VPK-150：QuickTiter?乙型肝炎核心抗原（HBcAg）ELISA試劑盒  

3. VPK-151：QuickTiter?丙型肝炎核心抗原（HCcAg）ELISA試劑盒  

4. VPK-156：QuickTiter?鼠白血病病毒核心抗原（MuLV p30）ELISA試劑盒  

5. VPK-5169：腺病毒六鄰體ELISA試劑盒  

試劑盒組成

盒1（室溫運(yùn)輸）  

1. 抗RSV-F抗體預(yù)包被板（部件編號(hào)51701B）：一條96孔板。  

2. FITC偶聯(lián)抗RSV-F單克隆抗體（部件編號(hào)51702C）：一瓶20 ?L。  

3. HRP偶聯(lián)抗FITC單克隆抗體（部件編號(hào)310811）：一瓶20 ?L。  

4. 檢測(cè)試劑稀釋液（部件編號(hào)310804）：一瓶50 mL。  

5. 10倍病毒裂解緩沖液（部件編號(hào)51693B）：一瓶15 mL，含200 mM Tris（pH 7.5）、1500 mM NaCl、10% Triton X-100、1% SDS。  

6. 10倍洗滌緩沖液（部件編號(hào)310806）：一瓶100 mL。  

7. 底物溶液（部件編號(hào)310807）：一瓶12 mL琥珀色瓶。  

8. 終止液（部件編號(hào)310808）：一瓶12 mL。  

盒2（藍(lán)冰運(yùn)輸）  

1. RSV融合蛋白標(biāo)準(zhǔn)品（部件編號(hào)51703D）：一瓶100 ?L，1 ?g/mL重組人RSV融合蛋白，溶于含BSA的PBS中。

未提供材料

1. RSV樣本：純化的病毒或未純化的病毒上清液  

2. 微量離心機(jī)  

3. 10 ?L到1000 ?L可調(diào)節(jié)單通道移液器及一次性吸頭  

4. 50 ?L到300 ?L可調(diào)節(jié)多通道移液器及一次性吸頭  

5. 多通道移液器儲(chǔ)液槽  

6. 能在450 nm處讀數(shù)的微孔板讀數(shù)儀（620 nm為可選參考波長(zhǎng)）  

保存方法

收到后，將RSV融合蛋白標(biāo)準(zhǔn)品分裝并保存在-20℃，避免反復(fù)凍融。將其他組分保存在4℃。

結(jié)果示例

以下圖表展示了典型的RSV融合蛋白ELISA結(jié)果。以下數(shù)據(jù)僅供參考，不應(yīng)用于解釋實(shí)際結(jié)果。

文獻(xiàn)參考：

1. Afonso, C. L. et al. (2016) Taxonomy of the order Mononegavirales. Arch. Virol. 161, 2351–2360.

2. Shi, T. et al. (2017) Global, regional, and national disease burden estimates of acute lower respiratory infections due to respiratory syncytial virus in young children in 2015: a systematic review and modelling study. Lancet 390, 946–958.

3. Teng, M. N., Whitehead, S. S. & Collins, P. L. (2001) Contribution of the respiratory syncytial virus G glycoprotein and its secreted and membrane-bound forms to virus replication in vitro and in vivo. Virology 289, 283–296.

4. McLellan, J. S. et al. (2013) Structure of RSV fusion glycoprotein trimer bound to a prefusionspecific neutralizing antibody. Science 340, 1113–1117.

5. Swanson, K. A. et al. (2011) Structural basis for immunization with postfusion respiratory syncytial virus fusion F glycoprotein (RSV F) to elicit high neutralizing antibody titers. Proc. Natl.Acad. Sci. USA 108, 9619–9624.

6. Gonzalez-Reyes, L. et al. (2001) Cleavage of the human respiratory syncytial virus fusion protein at two distinct sites is required for activation of membrane fusion. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98,9859–9864.

Cell Biolabs公司位于美國(guó)加利福尼亞州南部重要的工業(yè)城市圣迭戈（San Diego），是有名的細(xì)胞學(xué)試劑品牌，作為前沿的細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商，為生物技術(shù)和研究類客戶提供好的基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的g端產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。產(chǎn)品主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。全球眾多大學(xué)、政府研究機(jī)構(gòu)、生物、制藥企業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)室均在使用Cell Biolabs的產(chǎn)品。  

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