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293 HEK-293 (人胚腎細胞)

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更新時間:2025-03-05 16:56:00瀏覽次數(shù):327

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0001 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
293 [HEK-293] (人胚腎細胞)公司正在出售的產(chǎn)品:A-431 (人表皮癌細胞) 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶A549 [A-549] (人非小細胞肺癌細胞) 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶A-673 (人橫紋肌肉瘤細胞) 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶A9 (小鼠皮下結(jié)締組織細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱規(guī)格貨號
293 [HEK-293] (人胚腎細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶GOY-01X0001

商品介紹:

名稱    293 [HEK-293] (人胚腎細胞) 

別稱    Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293

種屬    人類

年齡(性別)    胎兒

組織來源    胚胎腎;以腺

病毒5DNA進行轉(zhuǎn)化    

生長特性    貼壁細胞

細胞形態(tài)    上皮細胞樣

背景描述    293 [HEK-293]細胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞形成的永生化細胞,293 [HEK-293]細胞包含并表達轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報道中指出,293 [HEK-293]細胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細胞為人類腺病毒載體擴增的宿主,可表達異常的玻連蛋白的細胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。

生物安全等級    2

生長培養(yǎng)基    MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S

推薦傳代比例    1:3-1:4

推薦換液頻率    2~3次/周

倍增時間    ~24-30小時

凍存條件    凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮

培養(yǎng)條件    氣相:空氣,95%;CO?,5%溫度:37℃

致瘤性    Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達情況    vitronectin

注意事項    該細胞貼壁松散,操作時請盡量輕柔;換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細胞團,為正?,F(xiàn)象,請按照收貨注意事項處理。


冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/p>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人3-羥基-3-甲基戊二酰MGCS1)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人3-硝基3-NT)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人25羥基(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人apelin 12(AP12)ELISA Ki    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

抗Beta Actin鼠單克隆抗體(可提供標記服務(wù))

抗Beta Actin兔多克隆抗體(可提供標記服務(wù))

抗GAPDH鼠單克隆抗體(可提供標記服務(wù))

抗GAPDH兔多克隆抗體(可提供標記服務(wù))

Western Blot與IP細胞裂解液(可提供標記服務(wù))

BCA蛋白定量檢測試劑盒(可提供標記服務(wù))

293 [HEK-293] (人胚腎細胞)彩色預(yù)染蛋白分子量標準(10-180 kDa)(可提供標記服務(wù))

SDS-PAGE凝膠配制試劑盒(可提供標記服務(wù))

PBS (Phosphate Buffered Saline, pH7.5, 10x)(可提供標記服務(wù))

AuraECL化學發(fā)光檢測試劑盒(可提供標記服務(wù))

RIPA裂解液(強)(可提供標記服務(wù))

Bradford蛋白定量檢測試劑盒(可提供標記服務(wù))



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