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293 HEK-293 (人胚腎細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2025-03-05 16:56:00瀏覽次數(shù):331

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0001 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)公司正在出售的產(chǎn)品:A-431 (人表皮癌細(xì)胞) 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶A549 [A-549] (人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞) 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶A-673 (人橫紋肌肉瘤細(xì)胞) 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶A9 (小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱規(guī)格貨號(hào)
293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶GOY-01X0001

商品介紹:

名稱    293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞) 

別稱    Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293

種屬    人類

年齡(性別)    胎兒

組織來(lái)源    胚胎腎;以腺

病毒5DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)化    

生長(zhǎng)特性    貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)    上皮細(xì)胞樣

背景描述    293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過(guò)的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞,293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報(bào)道中指出,293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA,但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過(guò)對(duì)Ad5的插入點(diǎn)的克隆測(cè)序發(fā)現(xiàn),Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號(hào)染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴(kuò)增的宿主,可表達(dá)異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體,由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。

生物安全等級(jí)    2

生長(zhǎng)培養(yǎng)基    MEM(ATCC改良)+10% FBS+1% P/S

推薦傳代比例    1:3-1:4

推薦換液頻率    2~3次/周

倍增時(shí)間    ~24-30小時(shí)

凍存條件    凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮

培養(yǎng)條件    氣相:空氣,95%;CO?,5%溫度:37℃

致瘤性    Yes, forms tumors in nude mice.

受體表達(dá)情況    vitronectin

注意事項(xiàng)    該細(xì)胞貼壁松散,操作時(shí)請(qǐng)盡量輕柔;換液時(shí)需預(yù)熱培養(yǎng)基;收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團(tuán),為正常現(xiàn)象,請(qǐng)按照收貨注意事項(xiàng)處理。


冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人3-羥基-3-甲基戊二酰MGCS1)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人3-硝基3-NT)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人25羥基(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA試劑盒      人ELISA試劑盒    96T/48T

人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人apelin 12(AP12)ELISA Ki    人ELISA試劑盒    96T/48T

人Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒    人ELISA試劑盒    96T/48T

抗Beta Actin鼠單克隆抗體(可提供標(biāo)記服務(wù))

抗Beta Actin兔多克隆抗體(可提供標(biāo)記服務(wù))

抗GAPDH鼠單克隆抗體(可提供標(biāo)記服務(wù))

抗GAPDH兔多克隆抗體(可提供標(biāo)記服務(wù))

Western Blot與IP細(xì)胞裂解液(可提供標(biāo)記服務(wù))

BCA蛋白定量檢測(cè)試劑盒(可提供標(biāo)記服務(wù))

293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(10-180 kDa)(可提供標(biāo)記服務(wù))

SDS-PAGE凝膠配制試劑盒(可提供標(biāo)記服務(wù))

PBS (Phosphate Buffered Saline, pH7.5, 10x)(可提供標(biāo)記服務(wù))

AuraECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒(可提供標(biāo)記服務(wù))

RIPA裂解液(強(qiáng))(可提供標(biāo)記服務(wù))

Bradford蛋白定量檢測(cè)試劑盒(可提供標(biāo)記服務(wù))



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