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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0001 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0001 |
商品介紹：
名稱 293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞) 別稱 Hek293; HEK-293; HEK 293; HEK:293; 293; 293 HEK; Human Embryonic Kidney 293 種屬 人類 年齡（性別） 胎兒 組織來源 胚胎腎；以腺 病毒5DNA進行轉(zhuǎn)化 生長特性 貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣 背景描述 293 [HEK-293]細(xì)胞是剪切過的人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染的人胚腎細(xì)胞形成的永生化細(xì)胞，293 [HEK-293]細(xì)胞包含并表達轉(zhuǎn)染的Ad5基因。早期報道中指出，293 [HEK-293]細(xì)胞基因組中含有腺病毒5(Ad5)基因組的左側(cè)端和右側(cè)端的DNA，但是現(xiàn)在明確了只存在其左側(cè)端的DNA。經(jīng)過對Ad5的插入點的克隆測序發(fā)現(xiàn)，Ad5的1-4344位線性核苷酸整合入293 [HEK-293]細(xì)胞19號染色體(19q13.2)。293 [HEK-293]細(xì)胞為人類腺病毒載體擴增的宿主，可表達異常的玻連蛋白的細(xì)胞表面受體，由整合素β1亞單位和玻連蛋白受體α-v亞單位組成。 生物安全等級 2 生長培養(yǎng)基 MEM（ATCC改良)＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~24-30小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO?，5%溫度：37℃ 致瘤性 Yes, forms tumors in nude mice. 受體表達情況 vitronectin 注意事項 該細(xì)胞貼壁松散，操作時請盡量輕柔；換液時需預(yù)熱培養(yǎng)基；收貨如有大塊脫落的細(xì)胞團，為正?，F(xiàn)象，請按照收貨注意事項處理。 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人3-羥基-3-甲基戊二酰MGCS1)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人3-硝基3-NT)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人6-羥多巴胺(6-OHDA)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人12羥二十烷四烯酸(12-HETE)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人17-酮類固醇(17-KS)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人25羥基(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人28S抗核糖體抗體(28S rRNP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人apelin 12(AP12)ELISA Ki 人ELISA試劑盒 96T/48T
人Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 96T/48T
抗Beta Actin鼠單克隆抗體（可提供標(biāo)記服務(wù)）
抗Beta Actin兔多克隆抗體（可提供標(biāo)記服務(wù)）
抗GAPDH鼠單克隆抗體（可提供標(biāo)記服務(wù)）
抗GAPDH兔多克隆抗體（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Western Blot與IP細(xì)胞裂解液（可提供標(biāo)記服務(wù)）
BCA蛋白定量檢測試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）
293 [HEK-293] (人胚腎細(xì)胞)彩色預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)(10-180 kDa)（可提供標(biāo)記服務(wù)）
SDS-PAGE凝膠配制試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）
PBS (Phosphate Buffered Saline, pH7.5, 10x)（可提供標(biāo)記服務(wù)）
AuraECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）
RIPA裂解液（強）（可提供標(biāo)記服務(wù)）
Bradford蛋白定量檢測試劑盒（可提供標(biāo)記服務(wù)）
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