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NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

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    上海市

規(guī)格
100管/96樣390元15 盒 可售
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更新時間:2025-03-05 12:24:19瀏覽次數(shù):531

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號 GOY-SH122 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 檢測方法 微量法
產(chǎn)品類別 輔酶Ⅱ系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:熊峽谷病毒PCR檢測試劑盒球孢白僵菌PCR檢測試劑盒貝巴魯病毒PCR檢測試劑盒貝氏貝諾孢子蟲PCR檢測試劑盒海藻百伯史坦菌PCR檢測試劑盒兩岐雙岐桿菌PCR檢測試劑盒長雙歧桿菌PCR檢測試劑盒雙歧桿菌屬通用PCR檢測試劑盒病毒PCR檢測試劑盒酵母菌屬通用PCR檢測試劑盒皮炎芽生菌PCR檢測試劑盒藍舌病病毒型PCR檢測試劑盒

詳細介紹

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗,不做其他科學(xué)實驗外的使用!
商品屬性:
NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

貨號

GOY-SH122

檢測方法

微量法

規(guī)格

100管/96樣

產(chǎn)品類別

輔酶Ⅱ系列

測定意義:

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細胞、動物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來植物ME活性測定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點。根據(jù)輔酶專一性和對底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測定原理:
NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測定NADH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:100mL×1 瓶,4℃保存。;

試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

樣本的前處理:

1、細菌、細胞或組織樣品的制備:

細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量

(104個):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,

加入 1mL 提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

訂購流程:

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

1、訂購前,請與銷售員核對產(chǎn)品中文名稱/CAS號/英文名稱等。

2、我司大部分產(chǎn)品都是現(xiàn)貨,產(chǎn)品核實好下單后即可當(dāng)天發(fā)貨。(庫存信息以當(dāng)日為準(zhǔn))如有特殊要求請在發(fā)貨前與銷售員聯(lián)系。

3、我司產(chǎn)品支持款到發(fā)貨、快遞代收尾款、網(wǎng)上現(xiàn)拍等付款方式。

4、質(zhì)量保證,嚴(yán)格把關(guān),如有產(chǎn)品異議經(jīng)公司鑒定確認后可包換包退,免除客戶后顧之憂。

5、我司提供完善的售后服務(wù),使用過程中如有任何疑問,可提供技術(shù)指導(dǎo)。

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

測定步驟:
NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

1、 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 檢測工作液的配制:用時在試劑三中加入 15mL 試劑一和 1mL 蒸餾水,充分混勻待用;

用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

3、 測定前將檢測工作液在 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上。

4、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、55μL 試劑二和 160μL 工作液,混勻

后立即記錄 340nm 處初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2,計算 ΔA=A2-A1。

注意:如果 ΔA<0.005,可將反應(yīng)時間延長到 2 分鐘或 5 分鐘。

NAD-ME 活性計算:

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T= 3617×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每 g 組織每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T =3617×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T =7.234×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2.25×10-4 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:

比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:

反應(yīng)時間,1 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 樣) ÷T= 7234×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質(zhì)濃度。

(2)按樣本鮮重計算:

單位的定義:每 g 組織每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣÷V 樣總×W) ÷T = 7234×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算:

單位的定義:每 1 萬個細菌或細胞每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣÷V 樣總×500) ÷T =14.468×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2.25×10-4 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol;d:96孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:

反應(yīng)時間,1 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

生化試劑盒的使用注意事項:
NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

選擇合適的試劑盒:根據(jù)實驗?zāi)康暮蜋z測對象選擇合適的試劑盒,確保實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。

嚴(yán)格遵循說明書:按照試劑盒的說明書進行操作,避免誤用或浪費。

注意保存條件:按照試劑盒的保存條件進行妥善保存,避免陽光直射、高溫或潮濕等不利因素。

控制實驗條件:在實驗過程中嚴(yán)格控制實驗條件,如溫度、時間、pH值等,以確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定性。

公司正在出售的產(chǎn)品:
NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法

植物花色苷測試盒

單胺氧化酶(MAO)測試盒可見分光光度法

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測試盒微量法

單寧含量測試盒微量法

超氧陰離子清除能力測試盒可見分光光度法

單寧含量測試盒可見分光光度法

單胺氧化酶(MAO)測試盒微量法

單寧酶(TAN)測試盒微量法

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測試盒可見分光光度法

單寧酶(TAN)測試盒紫外分光光度法

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法

抗肌內(nèi)膜檢測試劑盒 IgG ELISA Kit

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(WST8法)微量法

人基質(zhì)金屬蛋白26ELISA試劑盒

超氧陰離子測試盒微量法

人基質(zhì)金屬蛋白3ELISA試劑盒

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測試盒微量法

人基質(zhì)金屬蛋白7ELISA試劑盒

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測試盒可見分光光度法

人基質(zhì)金屬蛋白8ELISA試劑盒

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(NBT法)微量法

人基質(zhì)金屬蛋白9ELISA試劑盒

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒(WST8法)微量法

人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1ELISA試劑盒

超氧陰離子測試盒微量法

NAD蘋果酸酶(NADME)測試盒微量法人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2ELISA試劑盒

超氧陰離子測試盒可見分光光度法

人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3ELISA試劑盒

超氧陰離子清除能力測試盒微量法

人基質(zhì)裂解素ELISA試劑盒


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