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NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

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100管/96樣390元15 盒 可售
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更新時(shí)間:2025-03-05 12:24:19瀏覽次數(shù):532

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號(hào) GOY-SH122 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 檢測(cè)方法 微量法
產(chǎn)品類別 輔酶Ⅱ系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:熊峽谷病毒PCR檢測(cè)試劑盒球孢白僵菌PCR檢測(cè)試劑盒貝巴魯病毒PCR檢測(cè)試劑盒貝氏貝諾孢子蟲PCR檢測(cè)試劑盒海藻百伯史坦菌PCR檢測(cè)試劑盒兩岐雙岐桿菌PCR檢測(cè)試劑盒長(zhǎng)雙歧桿菌PCR檢測(cè)試劑盒雙歧桿菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒病毒PCR檢測(cè)試劑盒酵母菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒皮炎芽生菌PCR檢測(cè)試劑盒藍(lán)舌病病毒型PCR檢測(cè)試劑盒

詳細(xì)介紹

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
商品屬性:
NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

貨號(hào)

GOY-SH122

檢測(cè)方法

微量法

規(guī)格

100管/96樣

產(chǎn)品類別

輔酶Ⅱ系列

測(cè)定意義:

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法
ME廣泛存在于微生物、培養(yǎng)細(xì)胞、動(dòng)物和植物胞漿中,尤其在植物組織中活性較高。ME催化蘋果酸氧化脫羧的可逆反應(yīng),產(chǎn)生丙酮酸和CO2,以及伴隨NAD(P)+的還原反應(yīng),是蘋果酸代謝的關(guān)鍵酶。ME活性與生物合成和抗氧化密切相關(guān)。近年來(lái)植物ME活性測(cè)定較多,已經(jīng)成為抗氧化研究的熱點(diǎn)。根據(jù)輔酶專一性和對(duì)底物特異性的不同,可將ME分為NAD-ME(EC1.1.1.38)和NADP-ME(EC1.1.1.40)。
測(cè)定原理:
NAD-ME催化NAD+還原成NADH,在340nm下測(cè)定NADH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:100mL×1 瓶,4℃保存。;

試劑一:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 10mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

樣本的前處理:

1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備:

細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量

(104個(gè)):提取液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,

加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

訂購(gòu)流程:

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

1、訂購(gòu)前,請(qǐng)與銷售員核對(duì)產(chǎn)品中文名稱/CAS號(hào)/英文名稱等。

2、我司大部分產(chǎn)品都是現(xiàn)貨,產(chǎn)品核實(shí)好下單后即可當(dāng)天發(fā)貨。(庫(kù)存信息以當(dāng)日為準(zhǔn))如有特殊要求請(qǐng)?jiān)诎l(fā)貨前與銷售員聯(lián)系。

3、我司產(chǎn)品支持款到發(fā)貨、快遞代收尾款、網(wǎng)上現(xiàn)拍等付款方式。

4、質(zhì)量保證,嚴(yán)格把關(guān),如有產(chǎn)品異議經(jīng)公司鑒定確認(rèn)后可包換包退,免除客戶后顧之憂。

5、我司提供完善的售后服務(wù),使用過(guò)程中如有任何疑問(wèn),可提供技術(shù)指導(dǎo)。

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

測(cè)定步驟:
NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 檢測(cè)工作液的配制:用時(shí)在試劑三中加入 15mL 試劑一和 1mL 蒸餾水,充分混勻待用;

用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

3、 測(cè)定前將檢測(cè)工作液在 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)水浴 10min 以上。

4、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、55μL 試劑二和 160μL 工作液,混勻

后立即記錄 340nm 處初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2,計(jì)算 ΔA=A2-A1。

注意:如果 ΔA<0.005,可將反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng)到 2 分鐘或 5 分鐘。

NAD-ME 活性計(jì)算:

a.用微量石英比色皿測(cè)定的計(jì)算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T= 3617×ΔA÷Cpr

此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。

(2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每 g 組織每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W× V 樣÷V 樣總) ÷T =3617×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500×V 樣÷V 樣總) ÷T =7.234×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2.25×10-4 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol /cm;d:

比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:

反應(yīng)時(shí)間,1 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬(wàn)。

b.用 96 孔板測(cè)定的計(jì)算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算:

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V 樣) ÷T= 7234×ΔA÷Cpr

此法需要自行測(cè)定樣本蛋白質(zhì)濃度。

(2)按樣本鮮重計(jì)算:

單位的定義:每 g 組織每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣÷V 樣總×W) ÷T = 7234×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算:

單位的定義:每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成 1 nmol NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。

NAD-ME(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣÷V 樣總×500) ÷T =14.468×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2.25×10-4 L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103 L / mol;d:96孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:

反應(yīng)時(shí)間,1 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬(wàn)。

生化試劑盒的使用注意事項(xiàng):
NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

選擇合適的試劑盒:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜋z測(cè)對(duì)象選擇合適的試劑盒,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

嚴(yán)格遵循說(shuō)明書:按照試劑盒的說(shuō)明書進(jìn)行操作,避免誤用或浪費(fèi)。

注意保存條件:按照試劑盒的保存條件進(jìn)行妥善保存,避免陽(yáng)光直射、高溫或潮濕等不利因素。

控制實(shí)驗(yàn)條件:在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,如溫度、時(shí)間、pH值等,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。

公司正在出售的產(chǎn)品:
NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法

植物花色苷測(cè)試盒

單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒可見分光光度法

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測(cè)試盒微量法

單寧含量測(cè)試盒微量法

超氧陰離子清除能力測(cè)試盒可見分光光度法

單寧含量測(cè)試盒可見分光光度法

單胺氧化酶(MAO)測(cè)試盒微量法

單寧酶(TAN)測(cè)試盒微量法

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測(cè)試盒可見分光光度法

單寧酶(TAN)測(cè)試盒紫外分光光度法

超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒(NBT法)微量法

抗肌內(nèi)膜檢測(cè)試劑盒 IgG ELISA Kit

超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒(WST8法)微量法

人基質(zhì)金屬蛋白26ELISA試劑盒

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人基質(zhì)金屬蛋白7ELISA試劑盒

查爾酮異構(gòu)酶(CHI)測(cè)試盒可見分光光度法

人基質(zhì)金屬蛋白8ELISA試劑盒

超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒(NBT法)微量法

人基質(zhì)金屬蛋白9ELISA試劑盒

超氧化物歧化酶(SOD)測(cè)試盒(WST8法)微量法

人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1ELISA試劑盒

超氧陰離子測(cè)試盒微量法

NAD蘋果酸酶(NADME)測(cè)試盒微量法人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2ELISA試劑盒

超氧陰離子測(cè)試盒可見分光光度法

人基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3ELISA試劑盒

超氧陰離子清除能力測(cè)試盒微量法

人基質(zhì)裂解素ELISA試劑盒


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