難辨梭狀芽胞桿菌（Cd）核酸檢測(cè)試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸檢測(cè)試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸檢測(cè)試劑盒方法	48T	PCR檢測(cè)試劑盒

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸檢測(cè)試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書                                   1份

間三氟甲氧分子式：分子量：英文名稱：Amino group three fluorineCAS號(hào)：65876

二羥丙咪唑分子式：分子量：英文名稱：Dihydroxypropyl imidazoleCAS號(hào)：

5-(三正丁錫)嘧分子式：369.13分子量： C16H30N2Sn英文名稱：5- (tributylstannyl) pyrimidineCAS號(hào)：144173-85-3

五氟分子式：198.09分子量： C6H3F5N2英文名稱：Five fluorine hydrazineCAS號(hào)：828-73-9

駢三唑分子式：分子量：英文名稱：Benzo triazole threeCAS號(hào)：

靛藍(lán)二磺鈉英文名稱：Two indigo sulfonateCAS號(hào)：860-22-0分子式：466.36分子量： C16H8N2Na2O8S2

并(k)熒英文名稱：Benzo (k).CAS號(hào)：207-08-9分子式：252.31分子量： C20H12

丙砜分子式：182.24分子量： C9H10O2S英文名稱：Vinyl benzeneCAS號(hào)：16212-05-8

2-氟-5-甲分子式：236.03分子量： C7H6FI英文名稱：2- fluoride -5-CAS號(hào)：452-68-6

3,4-二甲氧溴分子式：217.06分子量： C8H9BrO2英文名稱：3,4- two - methoxyCAS號(hào)：2859-78-1

1-溴-2-氟-5-(三氟甲氧)分子式：分子量：英文名稱：1- -2- -5- (three f)CAS號(hào)：76575

難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸檢測(cè)試劑盒方法CSNK1G2  酪蛋白激酶1γ2抗體 0.2ml

RIN1  RAS抑制蛋白1抗體 0.2ml

ANKRD37  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體 0.2ml

phospho-FANCD2(Ser222)  磷酸化FANCD2抗體 0.1ml

HDHD3  HDHD3蛋白抗體 0.2ml

Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗牛IgM 0.1ml

TPO  甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體 0.2ml

P-selectin/CD62p  P選擇素抗體 0.1ml

WNT7A  原癌基因wnt7a蛋白抗體 0.1ml

C10orf132/GOLGA7B  10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框132抗體 0.2ml

alpha Actinin 4  α-輔肌動(dòng)蛋白4抗體 0.2ml

Dermokine beta  Dermokine β蛋白抗體 0.2ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。