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小鼠結腸黏膜上皮細胞

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更新時間:2025-02-28 14:39:32瀏覽次數(shù):472

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1171 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
小鼠結腸黏膜上皮細胞的相關*:真/酵母脫氧胸苷二二葡萄糖焦化(dTDP glucose pyrophosphorylase)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
紅酵母培養(yǎng)基 100毫升
小量酵母細胞*轉化試劑盒 20次
大量(文庫)酵母細胞*轉化試劑盒 10次
酵母細胞質粒提取試劑盒 20次
酵母斑雜交試劑盒 10次

詳細介紹

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產品屬性:   

產品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠結腸黏膜上皮細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1171

商品介紹:

名稱    小鼠結腸黏膜上皮細胞   

2.組織來源:結腸組織

3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

小鼠結腸黏膜上皮細胞分離自結腸組織;結腸在右髂窩內續(xù)于盲腸,在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分,大部分固定于腹后壁,結腸的排列酷似英文字母“M",將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為:黏膜(上皮層、固有層、黏膜肌層),黏膜下層(疏松結締組織),肌層(內環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?,外膜(纖維膜或漿膜)。腸黏膜上皮細胞是機體內外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質和強度。探討正常結腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養(yǎng)方法,為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關疾病建立合適的細胞模型。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠結腸黏膜上皮細胞采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的小鼠結腸黏膜上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-M159

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 TNFA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

 PPP2CA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

 IL6 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

小鼠 ERBB2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 HHIP 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

 HHIP 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

 PRKAA1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 HSPA8 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

小鼠結腸黏膜上皮細胞Candida sp.嗜環(huán)蛋白;親環(huán)素A檢測試劑盒

Candida sp.嗜酸性粒趨化蛋白檢測試劑盒

Saccharomyces cerevisiae嗜酸性粒陽離子蛋白檢測試劑盒

Saccharomyces cerevisiae受體TNFRSF結合激1檢測試劑盒

Rhodotorula minuta受體激檢測試劑盒

Pichia anomala受體相互作用蛋白1檢測試劑盒

Saccharomyces sp.瘦素檢測試劑盒

Saccharomyces sp.瘦素受體檢測試劑盒

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