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食管平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-02-28 12:19:18瀏覽次數(shù):268

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0809 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
食管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)*:冰凍切片游離膽固醇毛地黃皂苷法(DIGITONIN)高氯酸萘醌(PAN)染色試劑盒 50次
細(xì)胞總膽固醇舒爾茨染色試劑盒 50次
石蠟切片總膽固醇舒爾茨間接染色試劑盒 10次
石蠟切片總膽固醇舒爾茨直接染色試劑盒 50次
冰凍切片總膽固醇舒爾茨染色試劑盒 50次
細(xì)胞游離膽固醇毛地黃皂苷法(DIGITONIN)舒爾茨染色試劑盒 50次

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

食管平滑肌細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0809

商品介紹:

名稱    食管平滑肌細(xì)胞  

2.組織來源:食管組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

食管平滑肌細(xì)胞分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段,脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,肌層上1/3段為骨骼肌,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動(dòng)是由食管平滑肌收縮嚴(yán)格控制,食管還有括約肌,位于環(huán)狀軟骨水平的,稱為食管上括約?。晃挥谑彻芟露?,一部分在膈上,穿過膈孔,另一部分在膈下的高壓帶,稱為食管下括約肌。食管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的人食管平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的人食管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號(hào)CM-H032

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO25%

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 ITGA2B 基因全長ORF克隆

小鼠 IL23R 基因全長ORF克隆

小鼠 IL15RA 基因全長ORF克隆

小鼠 IgG3-Fc 基因ORF克隆 (非全長)

小鼠 IgG2b-Fc 基因ORF克隆 (非全長)

小鼠 IgG2a-Fc 基因ORF克隆 (非全長)

小鼠 IL12B 基因全長ORF克隆

小鼠 IL12A 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆

小鼠 FAU 基因全長ORF克隆

小鼠 MT-CO2 基因全長ORF克隆

食管平滑肌細(xì)胞31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Interferon gamma

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(XXVII) chain

78-5000 pg/mL 人ABO組織血型系統(tǒng)轉(zhuǎn)移(BGAT)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人鏈接斑珠蛋白(Junction plakoglobin)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Complement C1q subcomponent subunit A

0.312-20 ng/mL 人固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2(SREBP-2)ELISA試劑盒

1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 8

0.156-10 nmol/mL ELISA Kit for Human Myocardin

0.312-20 ug/mL 人巨噬唾液酸蛋白(Macrosialin)ELISA試劑盒

M-腸道菌瓊脂 英文名稱:M-Enterococcus Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

 


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